安徽中医学院学报
安徽中醫學院學報
안휘중의학원학보
2012年
2期
44-47
,共4页
彭程%苏婧婧%程卉%李庆林
彭程%囌婧婧%程卉%李慶林
팽정%소청청%정훼%리경림
新藤黄酸%细胞外信号调节激酶抑制剂%A549细胞%细胞凋亡
新籐黃痠%細胞外信號調節激酶抑製劑%A549細胞%細胞凋亡
신등황산%세포외신호조절격매억제제%A549세포%세포조망
目的 研究新藤黄酸(Gambogenic acid,GNA)与细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)特异性抑制剂PD98059联合应用对肺腺癌A549细胞生长的影响.方法 新藤黄酸与ERK特异性抑制剂PD98059处理肺腺癌A549细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化;甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞内活性氧的变化;蛋白印迹法(Western blot)检测ERK、p-ERK蛋白的表达.结果 MTT法结果表明GNA在2.5 μmol/L对肺腺癌A549细胞的增殖有抑制作用;与PD98059合用24 h,GNA的抑制作用更加明显.倒置显微镜观察显示GNA作用肺腺癌A549细胞24 h后,细胞固缩变圆,体积变小,部分细胞呈半贴壁状态;GNA和抑制剂PD98059合用后,多数细胞固缩变圆,脱落,并悬浮于培养液中;少数细胞体积增大、肿胀、破裂呈坏死状.流式细胞仪检测结果表明,20 μmol/L PD98059 + 2.5 μmol/L GNA共同作用于A549细胞24 h后,与GNA 2.5 μmol/L组比较细胞内活性氧生成增加.Western blot法检测表明,PD98059和GNA联合作用A549细胞24 h后,p-ERK蛋白表达与GNA组比较显著降低.结论 GNA能诱导肺腺癌A549细胞凋亡,联合应用ERK抑制剂PD98059后可减少ERK蛋白的活化,增加肺腺癌A549细胞的凋亡;结果初步表明GNA诱导肺腺癌A549细胞的凋亡可能与调节ERK信号通路有关.
目的 研究新籐黃痠(Gambogenic acid,GNA)與細胞外信號調節激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)特異性抑製劑PD98059聯閤應用對肺腺癌A549細胞生長的影響.方法 新籐黃痠與ERK特異性抑製劑PD98059處理肺腺癌A549細胞,倒置顯微鏡觀察細胞形態變化;甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法檢測細胞存活率;流式細胞儀檢測細胞內活性氧的變化;蛋白印跡法(Western blot)檢測ERK、p-ERK蛋白的錶達.結果 MTT法結果錶明GNA在2.5 μmol/L對肺腺癌A549細胞的增殖有抑製作用;與PD98059閤用24 h,GNA的抑製作用更加明顯.倒置顯微鏡觀察顯示GNA作用肺腺癌A549細胞24 h後,細胞固縮變圓,體積變小,部分細胞呈半貼壁狀態;GNA和抑製劑PD98059閤用後,多數細胞固縮變圓,脫落,併懸浮于培養液中;少數細胞體積增大、腫脹、破裂呈壞死狀.流式細胞儀檢測結果錶明,20 μmol/L PD98059 + 2.5 μmol/L GNA共同作用于A549細胞24 h後,與GNA 2.5 μmol/L組比較細胞內活性氧生成增加.Western blot法檢測錶明,PD98059和GNA聯閤作用A549細胞24 h後,p-ERK蛋白錶達與GNA組比較顯著降低.結論 GNA能誘導肺腺癌A549細胞凋亡,聯閤應用ERK抑製劑PD98059後可減少ERK蛋白的活化,增加肺腺癌A549細胞的凋亡;結果初步錶明GNA誘導肺腺癌A549細胞的凋亡可能與調節ERK信號通路有關.
목적 연구신등황산(Gambogenic acid,GNA)여세포외신호조절격매(extracellular signal regulated kinase,ERK)특이성억제제PD98059연합응용대폐선암A549세포생장적영향.방법 신등황산여ERK특이성억제제PD98059처리폐선암A549세포,도치현미경관찰세포형태변화;갑기새서기사서(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)법검측세포존활솔;류식세포의검측세포내활성양적변화;단백인적법(Western blot)검측ERK、p-ERK단백적표체.결과 MTT법결과표명GNA재2.5 μmol/L대폐선암A549세포적증식유억제작용;여PD98059합용24 h,GNA적억제작용경가명현.도치현미경관찰현시GNA작용폐선암A549세포24 h후,세포고축변원,체적변소,부분세포정반첩벽상태;GNA화억제제PD98059합용후,다수세포고축변원,탈락,병현부우배양액중;소수세포체적증대、종창、파렬정배사상.류식세포의검측결과표명,20 μmol/L PD98059 + 2.5 μmol/L GNA공동작용우A549세포24 h후,여GNA 2.5 μmol/L조비교세포내활성양생성증가.Western blot법검측표명,PD98059화GNA연합작용A549세포24 h후,p-ERK단백표체여GNA조비교현저강저.결론 GNA능유도폐선암A549세포조망,연합응용ERK억제제PD98059후가감소ERK단백적활화,증가폐선암A549세포적조망;결과초보표명GNA유도폐선암A549세포적조망가능여조절ERK신호통로유관.