解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2011年
4期
347-350
,共4页
顾卉%佟宇鑫%刘彤%李妍%李丹妮%袁正伟
顧卉%佟宇鑫%劉彤%李妍%李丹妮%袁正偉
고훼%동우흠%류동%리연%리단니%원정위
hLMO3基因%质粒构建%基因表达与定位%人HEK293细胞
hLMO3基因%質粒構建%基因錶達與定位%人HEK293細胞
hLMO3기인%질립구건%기인표체여정위%인HEK293세포
目的 构建hLMO3真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法 以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO3基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中.将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞HEK293细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测.利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-hLMO3在HEK293细胞内的定位.结果 hLMO3基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP中,酶切鉴定片段为440 bp;Western blot检测到融合蛋白在HEK293细胞表达,分子量约为42kDa,pEGFP-LMO3在人HEK293细胞中主要定位于细胞核内.结论 成功构建了hLMO3基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-LMO3蛋白在HEK293细胞中主要定位于细胞核内.
目的 構建hLMO3真覈錶達載體併證實融閤蛋白在細胞內的錶達及定位.方法 以人胎腦文庫cDNA為模闆,PCR擴增hLMO3基因cDNA全長,亞剋隆至pEGFP錶達載體中.將構建的重組質粒進行酶切測序鑒定,併轉染到人上皮細胞HEK293細胞中,提取細胞蛋白進行Western blot檢測.利用激光掃描共聚焦顯微鏡觀察pEGFP-hLMO3在HEK293細胞內的定位.結果 hLMO3基因cDNA全長剋隆到瞭真覈錶達載體pEGFP中,酶切鑒定片段為440 bp;Western blot檢測到融閤蛋白在HEK293細胞錶達,分子量約為42kDa,pEGFP-LMO3在人HEK293細胞中主要定位于細胞覈內.結論 成功構建瞭hLMO3基因cDNA全長的真覈錶達載體,pEGFP-LMO3蛋白在HEK293細胞中主要定位于細胞覈內.
목적 구건hLMO3진핵표체재체병증실융합단백재세포내적표체급정위.방법 이인태뇌문고cDNA위모판,PCR확증hLMO3기인cDNA전장,아극륭지pEGFP표체재체중.장구건적중조질립진행매절측서감정,병전염도인상피세포HEK293세포중,제취세포단백진행Western blot검측.이용격광소묘공취초현미경관찰pEGFP-hLMO3재HEK293세포내적정위.결과 hLMO3기인cDNA전장극륭도료진핵표체재체pEGFP중,매절감정편단위440 bp;Western blot검측도융합단백재HEK293세포표체,분자량약위42kDa,pEGFP-LMO3재인HEK293세포중주요정위우세포핵내.결론 성공구건료hLMO3기인cDNA전장적진핵표체재체,pEGFP-LMO3단백재HEK293세포중주요정위우세포핵내.
