世界科技研究与发展
世界科技研究與髮展
세계과기연구여발전
WORLD SCI-TECH R & D
2011年
1期
137-140
,共4页
张弘%丁晓燕%方廖琼%王智彪%乔海%刘阳%张小梅
張弘%丁曉燕%方廖瓊%王智彪%喬海%劉暘%張小梅
장홍%정효연%방료경%왕지표%교해%류양%장소매
稳定转染%增强型绿色荧光蛋白%B16黑色素瘤细胞%基因
穩定轉染%增彊型綠色熒光蛋白%B16黑色素瘤細胞%基因
은정전염%증강형록색형광단백%B16흑색소류세포%기인
目的 建立稳定表达绿色荧光蛋白的B16黑色素瘤细胞株,并研究其生物学特性.方法 转染增强型绿色荧光蛋白基因入B16细胞,经G418联合单克隆培养,筛选阳性细胞.激光共聚焦荧光显徽镜观察EGFP阳性细胞形态;流式细胞仪检测细胞内EGFP基因的蛋白表达;RT-PCR检测EGFP基因的mRNA表达;皮下接种及MTT法评价细胞在体内外的生长特性.结果 流式细胞仪检测表达绿色荧光蛋白的细胞阳性率为99.81 %,RT-PCR检测到EGFP基因的mRNA阳性表达.生长曲线显示其体外增殖趋势与B16相似,EGFP-B16体内成瘤速度较B16慢(p<0.05).结论 稳定表达绿色荧光蛋白的EGFP-B16细胞株成功建立,可作为进一步研究恶性黑色素瘤的材料.
目的 建立穩定錶達綠色熒光蛋白的B16黑色素瘤細胞株,併研究其生物學特性.方法 轉染增彊型綠色熒光蛋白基因入B16細胞,經G418聯閤單剋隆培養,篩選暘性細胞.激光共聚焦熒光顯徽鏡觀察EGFP暘性細胞形態;流式細胞儀檢測細胞內EGFP基因的蛋白錶達;RT-PCR檢測EGFP基因的mRNA錶達;皮下接種及MTT法評價細胞在體內外的生長特性.結果 流式細胞儀檢測錶達綠色熒光蛋白的細胞暘性率為99.81 %,RT-PCR檢測到EGFP基因的mRNA暘性錶達.生長麯線顯示其體外增殖趨勢與B16相似,EGFP-B16體內成瘤速度較B16慢(p<0.05).結論 穩定錶達綠色熒光蛋白的EGFP-B16細胞株成功建立,可作為進一步研究噁性黑色素瘤的材料.
목적 건립은정표체록색형광단백적B16흑색소류세포주,병연구기생물학특성.방법 전염증강형록색형광단백기인입B16세포,경G418연합단극륭배양,사선양성세포.격광공취초형광현휘경관찰EGFP양성세포형태;류식세포의검측세포내EGFP기인적단백표체;RT-PCR검측EGFP기인적mRNA표체;피하접충급MTT법평개세포재체내외적생장특성.결과 류식세포의검측표체록색형광단백적세포양성솔위99.81 %,RT-PCR검측도EGFP기인적mRNA양성표체.생장곡선현시기체외증식추세여B16상사,EGFP-B16체내성류속도교B16만(p<0.05).결론 은정표체록색형광단백적EGFP-B16세포주성공건립,가작위진일보연구악성흑색소류적재료.
