林业科学
林業科學
임업과학
SCIENTIA SILVAE SINICAE
2010年
11期
16-24
,共9页
文樵夫%沈红香%姚允聪%田佶%宋婷婷
文樵伕%瀋紅香%姚允聰%田佶%宋婷婷
문초부%침홍향%요윤총%전길%송정정
苹果属观赏海棠%叶片%二氢黄酮醇-4-还原酶基冈%花色苷%实时荧光定量PCR
蘋果屬觀賞海棠%葉片%二氫黃酮醇-4-還原酶基岡%花色苷%實時熒光定量PCR
평과속관상해당%협편%이경황동순-4-환원매기강%화색감%실시형광정량PCR
以苹果属观赏海棠品种‘王族'叶片总RNA为模板,通过RT-PCR与RACE扩增,获得1个1 247 bp的二氢黄酮醇-4-还原酶基因的cDNA序列,其基因编码区共1 021 bp,存在3个ORF,编码348个氨基酸,命名为McDFR.基因序列全长2 396 bp,有5个内含子,所有内含子的剪切位点均符合真核生物"GT-AG"规则.使用实时荧光定量PCR和紫外町见光分光光度计,对4种不同叶色类型的观赏海棠品种‘火焰'(绿色类叶片)、‘绚丽'(新叶有色类红色叶片)、‘高原之火'(新叶有色类红色叶片)和‘王族'(常色类紫色叶片)幼叶和功能叶中的McDFR表达及其花色苷和类黄酮的含量进行测定分析,结果表明:McDFR在4个品种的幼叶和功能叶中均有表达,肘cDFR表达量与花色苷积累有一定的相关性,McDFR在幼叶中表达量高于功能叶;在4个品种中,McDFR在‘高原之火'幼叶中表达量最大.幼叶中的类黄酮含量高于功能叶,McDFR表达量也大于功能叶.在功能叶中,除绿色叶品种‘火焰'外,类黄酮含量越高,肘cDFR的表达量越大,说明McDFR对苹果属观赏海棠叶片花色苷、类黄酮代谢途径及色泽形成具有重要作用.
以蘋果屬觀賞海棠品種‘王族'葉片總RNA為模闆,通過RT-PCR與RACE擴增,穫得1箇1 247 bp的二氫黃酮醇-4-還原酶基因的cDNA序列,其基因編碼區共1 021 bp,存在3箇ORF,編碼348箇氨基痠,命名為McDFR.基因序列全長2 396 bp,有5箇內含子,所有內含子的剪切位點均符閤真覈生物"GT-AG"規則.使用實時熒光定量PCR和紫外町見光分光光度計,對4種不同葉色類型的觀賞海棠品種‘火燄'(綠色類葉片)、‘絢麗'(新葉有色類紅色葉片)、‘高原之火'(新葉有色類紅色葉片)和‘王族'(常色類紫色葉片)幼葉和功能葉中的McDFR錶達及其花色苷和類黃酮的含量進行測定分析,結果錶明:McDFR在4箇品種的幼葉和功能葉中均有錶達,肘cDFR錶達量與花色苷積纍有一定的相關性,McDFR在幼葉中錶達量高于功能葉;在4箇品種中,McDFR在‘高原之火'幼葉中錶達量最大.幼葉中的類黃酮含量高于功能葉,McDFR錶達量也大于功能葉.在功能葉中,除綠色葉品種‘火燄'外,類黃酮含量越高,肘cDFR的錶達量越大,說明McDFR對蘋果屬觀賞海棠葉片花色苷、類黃酮代謝途徑及色澤形成具有重要作用.
이평과속관상해당품충‘왕족'협편총RNA위모판,통과RT-PCR여RACE확증,획득1개1 247 bp적이경황동순-4-환원매기인적cDNA서렬,기기인편마구공1 021 bp,존재3개ORF,편마348개안기산,명명위McDFR.기인서렬전장2 396 bp,유5개내함자,소유내함자적전절위점균부합진핵생물"GT-AG"규칙.사용실시형광정량PCR화자외정견광분광광도계,대4충불동협색류형적관상해당품충‘화염'(록색류협편)、‘현려'(신협유색류홍색협편)、‘고원지화'(신협유색류홍색협편)화‘왕족'(상색류자색협편)유협화공능협중적McDFR표체급기화색감화류황동적함량진행측정분석,결과표명:McDFR재4개품충적유협화공능협중균유표체,주cDFR표체량여화색감적루유일정적상관성,McDFR재유협중표체량고우공능협;재4개품충중,McDFR재‘고원지화'유협중표체량최대.유협중적류황동함량고우공능협,McDFR표체량야대우공능협.재공능협중,제록색협품충‘화염'외,류황동함량월고,주cDFR적표체량월대,설명McDFR대평과속관상해당협편화색감、류황동대사도경급색택형성구유중요작용.