中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2010年
8期
22-25,后插2
,共5页
姬志娟%盛树力%王蓉%赵志炜%张景艳%孟祥宏%张旭
姬誌娟%盛樹力%王蓉%趙誌煒%張景豔%孟祥宏%張旭
희지연%성수력%왕용%조지위%장경염%맹상굉%장욱
生长相关蛋白-43%多肽合成%抗体制备
生長相關蛋白-43%多肽閤成%抗體製備
생장상관단백-43%다태합성%항체제비
目的 对生长相关蛋白43(growth associated proteins-43,GAP-43)进行抗原表位分析并制备兔多克隆抗体.方法 通过对GAP-43 cDNA序列及氨基酸序列的结构进行生物信息分析,依据蛋白质的二级结构、亲水性、疏水性、抗原性及理化特性,经过同源性检索后,综合考虑抗体设计的其他因素,选出具有免疫活性的抗原决定簇多肽片段,采用有机固相多肽合成法合成了GAP-43的多肽片段,并与载体蛋白血蓝蛋白(KLH)偶联制备成抗原,免疫新西兰家兔.结果 ELISA测定GAP-43抗体效价为1:32 000;Western blot检测结果显示:在分子量25kDa出现单一条带;免疫组织化学法检测显示:GAP-43蛋白在小鼠海马神经元中有表达;免疫细胞化学法检测显示:GAP-43蛋白在人神经母细胞瘤株SH-SY5Y中存在表达.结论 利用生物信息学软件比较准确地预测GAP-43的抗原决定簇,并成功制备了高效价、高特异性的多肽抗体.
目的 對生長相關蛋白43(growth associated proteins-43,GAP-43)進行抗原錶位分析併製備兔多剋隆抗體.方法 通過對GAP-43 cDNA序列及氨基痠序列的結構進行生物信息分析,依據蛋白質的二級結構、親水性、疏水性、抗原性及理化特性,經過同源性檢索後,綜閤攷慮抗體設計的其他因素,選齣具有免疫活性的抗原決定簇多肽片段,採用有機固相多肽閤成法閤成瞭GAP-43的多肽片段,併與載體蛋白血藍蛋白(KLH)偶聯製備成抗原,免疫新西蘭傢兔.結果 ELISA測定GAP-43抗體效價為1:32 000;Western blot檢測結果顯示:在分子量25kDa齣現單一條帶;免疫組織化學法檢測顯示:GAP-43蛋白在小鼠海馬神經元中有錶達;免疫細胞化學法檢測顯示:GAP-43蛋白在人神經母細胞瘤株SH-SY5Y中存在錶達.結論 利用生物信息學軟件比較準確地預測GAP-43的抗原決定簇,併成功製備瞭高效價、高特異性的多肽抗體.
목적 대생장상관단백43(growth associated proteins-43,GAP-43)진행항원표위분석병제비토다극륭항체.방법 통과대GAP-43 cDNA서렬급안기산서렬적결구진행생물신식분석,의거단백질적이급결구、친수성、소수성、항원성급이화특성,경과동원성검색후,종합고필항체설계적기타인소,선출구유면역활성적항원결정족다태편단,채용유궤고상다태합성법합성료GAP-43적다태편단,병여재체단백혈람단백(KLH)우련제비성항원,면역신서란가토.결과 ELISA측정GAP-43항체효개위1:32 000;Western blot검측결과현시:재분자량25kDa출현단일조대;면역조직화학법검측현시:GAP-43단백재소서해마신경원중유표체;면역세포화학법검측현시:GAP-43단백재인신경모세포류주SH-SY5Y중존재표체.결론 이용생물신식학연건비교준학지예측GAP-43적항원결정족,병성공제비료고효개、고특이성적다태항체.
