国际眼科杂志
國際眼科雜誌
국제안과잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY
2009年
5期
833-835
,共3页
姚家奇%刘庆淮%刘肖艺%许志洋%李建民
姚傢奇%劉慶淮%劉肖藝%許誌洋%李建民
요가기%류경회%류초예%허지양%리건민
实时荧光定量PCR%17-AAG%视网膜色素上皮细胞%热休克蛋白90%VEGF
實時熒光定量PCR%17-AAG%視網膜色素上皮細胞%熱休剋蛋白90%VEGF
실시형광정량PCR%17-AAG%시망막색소상피세포%열휴극단백90%VEGF
目的:体外观察17-AAG对人RPE细胞中VEGFA,VEGFB,VEGFR1,VEGFR2基因表达的调控. 方法:体外培养人RPE细胞株加入17-AAG并作用不同浓度及时间梯度后,收集细胞,抽提RNA进行反转录.同时根据VEGFA,VEGFB,VEGFR1,VEGFR2的基因序列,设计相应的引物,进行RT-PCR,琼脂糖凝胶电泳用于分析引物的特异性,再利用ABI 7300PCR仪和SYBR Green,建立实时荧光PCR反应条件,通过比较Ct进行基因表达的相对定量分析. 结果:17-AAG可以下调VEGFA,VEGFB和VEGFR1基因的表达,而VEGFR2只有再高浓度17-AAG作用时才下调.结论:17-AAG可抑制RPE细胞VEGF及其受体基因.
目的:體外觀察17-AAG對人RPE細胞中VEGFA,VEGFB,VEGFR1,VEGFR2基因錶達的調控. 方法:體外培養人RPE細胞株加入17-AAG併作用不同濃度及時間梯度後,收集細胞,抽提RNA進行反轉錄.同時根據VEGFA,VEGFB,VEGFR1,VEGFR2的基因序列,設計相應的引物,進行RT-PCR,瓊脂糖凝膠電泳用于分析引物的特異性,再利用ABI 7300PCR儀和SYBR Green,建立實時熒光PCR反應條件,通過比較Ct進行基因錶達的相對定量分析. 結果:17-AAG可以下調VEGFA,VEGFB和VEGFR1基因的錶達,而VEGFR2隻有再高濃度17-AAG作用時纔下調.結論:17-AAG可抑製RPE細胞VEGF及其受體基因.
목적:체외관찰17-AAG대인RPE세포중VEGFA,VEGFB,VEGFR1,VEGFR2기인표체적조공. 방법:체외배양인RPE세포주가입17-AAG병작용불동농도급시간제도후,수집세포,추제RNA진행반전록.동시근거VEGFA,VEGFB,VEGFR1,VEGFR2적기인서렬,설계상응적인물,진행RT-PCR,경지당응효전영용우분석인물적특이성,재이용ABI 7300PCR의화SYBR Green,건립실시형광PCR반응조건,통과비교Ct진행기인표체적상대정량분석. 결과:17-AAG가이하조VEGFA,VEGFB화VEGFR1기인적표체,이VEGFR2지유재고농도17-AAG작용시재하조.결론:17-AAG가억제RPE세포VEGF급기수체기인.
