中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2008年
6期
424-427
,共4页
孙晓梅%曹春渝%高家红%黄璋琼%陆彩霞%陈瑜%陈洁%代解杰
孫曉梅%曹春渝%高傢紅%黃璋瓊%陸綵霞%陳瑜%陳潔%代解傑
손효매%조춘투%고가홍%황장경%륙채하%진유%진길%대해걸
实验猕猴%外周血单核细胞%造血干细胞%采集
實驗獼猴%外週血單覈細胞%造血榦細胞%採集
실험미후%외주혈단핵세포%조혈간세포%채집
目的 使用COBE Spectra血液成分分离机大量采集实验猕猴外周血单核细胞(PBMCs),继而可从中分离得到外周血造血干细胞(PBSC),为进一步利用猕猴开展免疫学研究、基因治疗提供足够的目的 细胞,探讨采集的关键技术,建立安全、有效的采集方法.方法 体重为4-5奴的实验猕猴5只,采集前一个月内分3次进行自体或异体血液于4℃储备共120 mL,用于采集时填充管路.5只猴采集前接受rhGM-CSF 20μg/ks皮下注射动员4～5 d,麻醉动物后行股动脉穿刺,选择自动外周血干细胞收集程序(Auto-PBSC)进行采集.采集结束后管路中血液以10 mL/min回输给动物3～5 min.结果 生长因子连续注射第4天外周血白细胞数增至最高,收获细胞数量随循环血量和采集次数增加而增多.经动员的所有猴能够采集到需要的PBMC,最多达9.9×108,采集次数1～3次,循环血量达750～1420 mL,实验结束后1只猕猴因心脏衰竭死亡.结论 人用血细胞分离机可用于4～5 kg实验猕猴PBMC的大量采集.由于动物不同于人体,为保证采集成功需要选用适合于猕猴的程序,采集前做好储血和生长因子动员准备,稳定的麻醉保定,提高抗凝剂比例,积极处理并发症是关键.
目的 使用COBE Spectra血液成分分離機大量採集實驗獼猴外週血單覈細胞(PBMCs),繼而可從中分離得到外週血造血榦細胞(PBSC),為進一步利用獼猴開展免疫學研究、基因治療提供足夠的目的 細胞,探討採集的關鍵技術,建立安全、有效的採集方法.方法 體重為4-5奴的實驗獼猴5隻,採集前一箇月內分3次進行自體或異體血液于4℃儲備共120 mL,用于採集時填充管路.5隻猴採集前接受rhGM-CSF 20μg/ks皮下註射動員4～5 d,痳醉動物後行股動脈穿刺,選擇自動外週血榦細胞收集程序(Auto-PBSC)進行採集.採集結束後管路中血液以10 mL/min迴輸給動物3～5 min.結果 生長因子連續註射第4天外週血白細胞數增至最高,收穫細胞數量隨循環血量和採集次數增加而增多.經動員的所有猴能夠採集到需要的PBMC,最多達9.9×108,採集次數1～3次,循環血量達750～1420 mL,實驗結束後1隻獼猴因心髒衰竭死亡.結論 人用血細胞分離機可用于4～5 kg實驗獼猴PBMC的大量採集.由于動物不同于人體,為保證採集成功需要選用適閤于獼猴的程序,採集前做好儲血和生長因子動員準備,穩定的痳醉保定,提高抗凝劑比例,積極處理併髮癥是關鍵.
목적 사용COBE Spectra혈액성분분리궤대량채집실험미후외주혈단핵세포(PBMCs),계이가종중분리득도외주혈조혈간세포(PBSC),위진일보이용미후개전면역학연구、기인치료제공족구적목적 세포,탐토채집적관건기술,건립안전、유효적채집방법.방법 체중위4-5노적실험미후5지,채집전일개월내분3차진행자체혹이체혈액우4℃저비공120 mL,용우채집시전충관로.5지후채집전접수rhGM-CSF 20μg/ks피하주사동원4～5 d,마취동물후행고동맥천자,선택자동외주혈간세포수집정서(Auto-PBSC)진행채집.채집결속후관로중혈액이10 mL/min회수급동물3～5 min.결과 생장인자련속주사제4천외주혈백세포수증지최고,수획세포수량수순배혈량화채집차수증가이증다.경동원적소유후능구채집도수요적PBMC,최다체9.9×108,채집차수1～3차,순배혈량체750～1420 mL,실험결속후1지미후인심장쇠갈사망.결론 인용혈세포분리궤가용우4～5 kg실험미후PBMC적대량채집.유우동물불동우인체,위보증채집성공수요선용괄합우미후적정서,채집전주호저혈화생장인자동원준비,은정적마취보정,제고항응제비례,적겁처리병발증시관건.
