海南医学院学报
海南醫學院學報
해남의학원학보
2008年
6期
612-615,620
,共5页
解娜%黄幼生%苏坚%廖前进%苏琦
解娜%黃幼生%囌堅%廖前進%囌琦
해나%황유생%소견%료전진%소기
二烯丙基二硫%结肠癌%差异表达%抑制性消减杂交
二烯丙基二硫%結腸癌%差異錶達%抑製性消減雜交
이희병기이류%결장암%차이표체%억제성소감잡교
目的:构建二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人结肠癌HT-29细胞差异表达cDNA文库,以期寻找、克隆DADS特异性作用靶点基因.方法:用120 μmol/L的DADS处理人结肠癌HT-29细胞,从DADS处理组及对照组HT-29细胞中提取poly A+RNA,应用高效、灵敏的抑制性消减杂交(SSH)技术构建DADS诱导人结肠癌细胞差异表达cDNA消减文库,再转染大肠杆菌进行文库扩增.结果:成功构建具有高消减效率的DADS诱导人结肠癌细胞差异表达cDNA文库,文库扩增得到了500个克隆,随机挑取100个制备质粒,酶切分析均得到150-1 300 bp大小插入片段,这些片段可能就是载有高度特异性的目的片段.结论:建立了DADS诱导人结肠癌细胞差异表达cDNA文库,为进一步寻找、克隆DADS特异性作用靶点基因奠定了基础.
目的:構建二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)誘導人結腸癌HT-29細胞差異錶達cDNA文庫,以期尋找、剋隆DADS特異性作用靶點基因.方法:用120 μmol/L的DADS處理人結腸癌HT-29細胞,從DADS處理組及對照組HT-29細胞中提取poly A+RNA,應用高效、靈敏的抑製性消減雜交(SSH)技術構建DADS誘導人結腸癌細胞差異錶達cDNA消減文庫,再轉染大腸桿菌進行文庫擴增.結果:成功構建具有高消減效率的DADS誘導人結腸癌細胞差異錶達cDNA文庫,文庫擴增得到瞭500箇剋隆,隨機挑取100箇製備質粒,酶切分析均得到150-1 300 bp大小插入片段,這些片段可能就是載有高度特異性的目的片段.結論:建立瞭DADS誘導人結腸癌細胞差異錶達cDNA文庫,為進一步尋找、剋隆DADS特異性作用靶點基因奠定瞭基礎.
목적:구건이희병기이류(diallyl disulfide,DADS)유도인결장암HT-29세포차이표체cDNA문고,이기심조、극륭DADS특이성작용파점기인.방법:용120 μmol/L적DADS처리인결장암HT-29세포,종DADS처리조급대조조HT-29세포중제취poly A+RNA,응용고효、령민적억제성소감잡교(SSH)기술구건DADS유도인결장암세포차이표체cDNA소감문고,재전염대장간균진행문고확증.결과:성공구건구유고소감효솔적DADS유도인결장암세포차이표체cDNA문고,문고확증득도료500개극륭,수궤도취100개제비질립,매절분석균득도150-1 300 bp대소삽입편단,저사편단가능취시재유고도특이성적목적편단.결론:건립료DADS유도인결장암세포차이표체cDNA문고,위진일보심조、극륭DADS특이성작용파점기인전정료기출.
