中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
8期
662-664,668
,共4页
谢俊秋%ZHANG Qing-hua%张雪燕%姚海燕%韩跃武
謝俊鞦%ZHANG Qing-hua%張雪燕%姚海燕%韓躍武
사준추%ZHANG Qing-hua%장설연%요해연%한약무
新城疫病毒%九肽%突变体%克隆%原核表达
新城疫病毒%九肽%突變體%剋隆%原覈錶達
신성역병독%구태%돌변체%극륭%원핵표체
目的 克隆并表达抑制新城疫病毒(NDV)繁殖的九肽(Nonapeptide)及其突变体基因.方法 设计并合成Nonapeptide 2串联体及其突变体基因,克隆于质粒pUC18,经酶切回收目的 基因,与经相同酶切的表达载体pGEX-4T-1连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性菌落,抽提质粒进行鉴定.IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果 重组表达质粒经双酶切、PCR及测序鉴定,证明构建正确.阳性重组菌的诱导表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约29 000处可见一明显条带,与理论值相符.Nonapeptide 2及其突变体蛋白的表达量分别占菌体总蛋白的41%和37%.Western blot结果显示两种蛋白均具有良好的反应原性.结论 已成功克隆并表达了抗NDV繁殖的Nonapeptide及其突变体基因.
目的 剋隆併錶達抑製新城疫病毒(NDV)繁殖的九肽(Nonapeptide)及其突變體基因.方法 設計併閤成Nonapeptide 2串聯體及其突變體基因,剋隆于質粒pUC18,經酶切迴收目的 基因,與經相同酶切的錶達載體pGEX-4T-1連接,轉化大腸桿菌BL21(DE3),篩選暘性菌落,抽提質粒進行鑒定.IPTG誘導錶達後,進行SDS-PAGE及Western blot鑒定.結果 重組錶達質粒經雙酶切、PCR及測序鑒定,證明構建正確.暘性重組菌的誘導錶達產物經SDS-PAGE分析,在相對分子質量約29 000處可見一明顯條帶,與理論值相符.Nonapeptide 2及其突變體蛋白的錶達量分彆佔菌體總蛋白的41%和37%.Western blot結果顯示兩種蛋白均具有良好的反應原性.結論 已成功剋隆併錶達瞭抗NDV繁殖的Nonapeptide及其突變體基因.
목적 극륭병표체억제신성역병독(NDV)번식적구태(Nonapeptide)급기돌변체기인.방법 설계병합성Nonapeptide 2천련체급기돌변체기인,극륭우질립pUC18,경매절회수목적 기인,여경상동매절적표체재체pGEX-4T-1련접,전화대장간균BL21(DE3),사선양성균락,추제질립진행감정.IPTG유도표체후,진행SDS-PAGE급Western blot감정.결과 중조표체질립경쌍매절、PCR급측서감정,증명구건정학.양성중조균적유도표체산물경SDS-PAGE분석,재상대분자질량약29 000처가견일명현조대,여이론치상부.Nonapeptide 2급기돌변체단백적표체량분별점균체총단백적41%화37%.Western blot결과현시량충단백균구유량호적반응원성.결론 이성공극륭병표체료항NDV번식적Nonapeptide급기돌변체기인.
