中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
4期
269-272
,共4页
张庆华%韩跃武%谢俊秋%卢天龙%任惠子%冯惟萍
張慶華%韓躍武%謝俊鞦%盧天龍%任惠子%馮惟萍
장경화%한약무%사준추%로천룡%임혜자%풍유평
抗菌肽%Dermaseptin S4%突变体%大肠杆菌%表达
抗菌肽%Dermaseptin S4%突變體%大腸桿菌%錶達
항균태%Dermaseptin S4%돌변체%대장간균%표체
目的 构建表达抗菌肽Dermaseptin S4(DS4)及其突变体K4-S4的工程菌,并表达目的 蛋白.方法 采用重叠延伸PCR法设计和扩增抗菌肽DS4及K4-S4基因,定向克隆入载体pUC-18中,经酶切、测序鉴定,重组至表达载体pGEX-4T-1中,构建抗菌肽DS4及K4-S4基因表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)plyS,经IPTG诱导表达,12%SDS-PAGE鉴定.结果 构建的抗菌肽DS4及K4-S4基因工程菌所表达的目的 蛋白,经SDS-PAGE鉴定可见相对分子质量34 000的特异性目的 条带,37℃诱导5 h的蛋白表达量最高,且多数以包涵体形式存在.结论 已成功构建抗菌肽DS4及K4-S4工程菌,并表达目的 蛋白,为进一步研究其功能和应用奠定了基础.
目的 構建錶達抗菌肽Dermaseptin S4(DS4)及其突變體K4-S4的工程菌,併錶達目的 蛋白.方法 採用重疊延伸PCR法設計和擴增抗菌肽DS4及K4-S4基因,定嚮剋隆入載體pUC-18中,經酶切、測序鑒定,重組至錶達載體pGEX-4T-1中,構建抗菌肽DS4及K4-S4基因錶達載體,轉化大腸桿菌BL21(DE3)plyS,經IPTG誘導錶達,12%SDS-PAGE鑒定.結果 構建的抗菌肽DS4及K4-S4基因工程菌所錶達的目的 蛋白,經SDS-PAGE鑒定可見相對分子質量34 000的特異性目的 條帶,37℃誘導5 h的蛋白錶達量最高,且多數以包涵體形式存在.結論 已成功構建抗菌肽DS4及K4-S4工程菌,併錶達目的 蛋白,為進一步研究其功能和應用奠定瞭基礎.
목적 구건표체항균태Dermaseptin S4(DS4)급기돌변체K4-S4적공정균,병표체목적 단백.방법 채용중첩연신PCR법설계화확증항균태DS4급K4-S4기인,정향극륭입재체pUC-18중,경매절、측서감정,중조지표체재체pGEX-4T-1중,구건항균태DS4급K4-S4기인표체재체,전화대장간균BL21(DE3)plyS,경IPTG유도표체,12%SDS-PAGE감정.결과 구건적항균태DS4급K4-S4기인공정균소표체적목적 단백,경SDS-PAGE감정가견상대분자질량34 000적특이성목적 조대,37℃유도5 h적단백표체량최고,차다수이포함체형식존재.결론 이성공구건항균태DS4급K4-S4공정균,병표체목적 단백,위진일보연구기공능화응용전정료기출.
