中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
1期
26-29
,共4页
王志平%李兆辉%陈健%文力正%罗翔丹%潘风光
王誌平%李兆輝%陳健%文力正%囉翔丹%潘風光
왕지평%리조휘%진건%문력정%라상단%반풍광
马立克病%L-meq基因%p53基因%转录%端粒酶活性
馬立剋病%L-meq基因%p53基因%轉錄%耑粒酶活性
마립극병%L-meq기인%p53기인%전록%단립매활성
目的 研究鸡马立克病(MD)潜伏期L-meq基因对鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)p53 mRNA转录水平的影响,并探讨L-meq基因与端粒酶活性的关系.方法 构建真核转染质粒pcDNA-L-meq,转染CEF细胞,采用实时荧光相对定量RT-PCR法检测MD潜伏期L-meq基因对CEF细胞p53 mRNA转录水平的影响,并用改进的TRAP法检测端粒酶活性.结果 质粒pcDNA-L-meq经PCR及双酶切鉴定,均可见大小为1 200 bp的特异性片段.L-meq基因能激活CEF细胞中p53 mRNA的转录,在转染后48和72 h,p53 mRNA的转录水平较相应的内参照升高,但在转染后72 h,p53 mRNA转录水平降低,其RQ值由48 h的0.15下降为72 h的0.05.转染L-meq基因48和72 h后,CEF细胞中端粒酶活性均比对照组稍微升高,但在48 h的端粒酶活性比72 h的稍高.结论 鸡马立克病潜伏期L-meq基因能微弱地刺激端粒酶活性和p53 mRNA转录.
目的 研究鷄馬立剋病(MD)潛伏期L-meq基因對鷄胚成纖維細胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)p53 mRNA轉錄水平的影響,併探討L-meq基因與耑粒酶活性的關繫.方法 構建真覈轉染質粒pcDNA-L-meq,轉染CEF細胞,採用實時熒光相對定量RT-PCR法檢測MD潛伏期L-meq基因對CEF細胞p53 mRNA轉錄水平的影響,併用改進的TRAP法檢測耑粒酶活性.結果 質粒pcDNA-L-meq經PCR及雙酶切鑒定,均可見大小為1 200 bp的特異性片段.L-meq基因能激活CEF細胞中p53 mRNA的轉錄,在轉染後48和72 h,p53 mRNA的轉錄水平較相應的內參照升高,但在轉染後72 h,p53 mRNA轉錄水平降低,其RQ值由48 h的0.15下降為72 h的0.05.轉染L-meq基因48和72 h後,CEF細胞中耑粒酶活性均比對照組稍微升高,但在48 h的耑粒酶活性比72 h的稍高.結論 鷄馬立剋病潛伏期L-meq基因能微弱地刺激耑粒酶活性和p53 mRNA轉錄.
목적 연구계마립극병(MD)잠복기L-meq기인대계배성섬유세포(Chicken embryo fibroblast,CEF)p53 mRNA전록수평적영향,병탐토L-meq기인여단립매활성적관계.방법 구건진핵전염질립pcDNA-L-meq,전염CEF세포,채용실시형광상대정량RT-PCR법검측MD잠복기L-meq기인대CEF세포p53 mRNA전록수평적영향,병용개진적TRAP법검측단립매활성.결과 질립pcDNA-L-meq경PCR급쌍매절감정,균가견대소위1 200 bp적특이성편단.L-meq기인능격활CEF세포중p53 mRNA적전록,재전염후48화72 h,p53 mRNA적전록수평교상응적내삼조승고,단재전염후72 h,p53 mRNA전록수평강저,기RQ치유48 h적0.15하강위72 h적0.05.전염L-meq기인48화72 h후,CEF세포중단립매활성균비대조조초미승고,단재48 h적단립매활성비72 h적초고.결론 계마립극병잠복기L-meq기인능미약지자격단립매활성화p53 mRNA전록.
