中国当代儿科杂志
中國噹代兒科雜誌
중국당대인과잡지
CHINA JOURNAL OF CONTEMPORARY PEDIATRICS
2007年
6期
587-590
,共4页
陈淳媛%孙跃女%杨作成%龙燕琼
陳淳媛%孫躍女%楊作成%龍燕瓊
진순원%손약녀%양작성%룡연경
雷帕霉素%柯萨奇B3病毒%心肌成纤维细胞%eIF-4E
雷帕黴素%柯薩奇B3病毒%心肌成纖維細胞%eIF-4E
뢰파매소%가살기B3병독%심기성섬유세포%eIF-4E
目的 探讨雷帕霉素对柯萨奇病毒B3诱导的心肌成纤维细胞eIF-4E表达的影响,寻找病毒性心肌炎的药物治疗靶点.方法 选用MOI为0.5 PFU/cell的柯萨奇病毒B3感染心肌成纤维细胞,利用细胞形态及RT-PCR法检测细胞内柯萨奇病毒B3 mRNA表达,确定柯萨奇病毒B3成功感染心肌成纤维细胞.以10nM雷帕霉素干预,采用RT-PCR及Western blot检测对照组、病毒组(MOI为0.5 PFU/cell)、雷帕霉素组及病毒+雷帕霉素组eIF-4E表达.结果 MOI为0.5 PFU/cell的柯萨奇病毒B3感染心肌成纤维细胞,透射电镜下可见细胞形态改变,胞浆内可见病毒颗粒.RT-PCR结果显示:感染后第1天、第2天、第3天及传代后第2天细胞有病毒mRNA表达.RT-PCR检测上述4组的eIF-4E/β-actin光密度比值分别为:0.73±0.07,0.87±0.03,0.32±0.03,0.56±0.04;Western blot灰度值分别为:0.79±0.09,1.35±0.12,0.55±0.04,0.62±0.07;RT-PCR及Western blot结果显示:病毒组eIF-4E表达高于对照组,雷帕霉素组和病毒+雷帕霉素组低于对照组及病毒组(均P＜0.05).结论 柯萨奇病毒B3可感染心肌成纤维细胞,并使eIF-4E表达增加,雷帕霉素可抑制其表达,提示心肌成纤维细胞可能通过mTOR/eIF-4E信号通路参与病毒性心肌炎的发病机制,雷帕霉素对病毒性心肌炎有潜在的治疗作用.
目的 探討雷帕黴素對柯薩奇病毒B3誘導的心肌成纖維細胞eIF-4E錶達的影響,尋找病毒性心肌炎的藥物治療靶點.方法 選用MOI為0.5 PFU/cell的柯薩奇病毒B3感染心肌成纖維細胞,利用細胞形態及RT-PCR法檢測細胞內柯薩奇病毒B3 mRNA錶達,確定柯薩奇病毒B3成功感染心肌成纖維細胞.以10nM雷帕黴素榦預,採用RT-PCR及Western blot檢測對照組、病毒組(MOI為0.5 PFU/cell)、雷帕黴素組及病毒+雷帕黴素組eIF-4E錶達.結果 MOI為0.5 PFU/cell的柯薩奇病毒B3感染心肌成纖維細胞,透射電鏡下可見細胞形態改變,胞漿內可見病毒顆粒.RT-PCR結果顯示:感染後第1天、第2天、第3天及傳代後第2天細胞有病毒mRNA錶達.RT-PCR檢測上述4組的eIF-4E/β-actin光密度比值分彆為:0.73±0.07,0.87±0.03,0.32±0.03,0.56±0.04;Western blot灰度值分彆為:0.79±0.09,1.35±0.12,0.55±0.04,0.62±0.07;RT-PCR及Western blot結果顯示:病毒組eIF-4E錶達高于對照組,雷帕黴素組和病毒+雷帕黴素組低于對照組及病毒組(均P＜0.05).結論 柯薩奇病毒B3可感染心肌成纖維細胞,併使eIF-4E錶達增加,雷帕黴素可抑製其錶達,提示心肌成纖維細胞可能通過mTOR/eIF-4E信號通路參與病毒性心肌炎的髮病機製,雷帕黴素對病毒性心肌炎有潛在的治療作用.
목적 탐토뢰파매소대가살기병독B3유도적심기성섬유세포eIF-4E표체적영향,심조병독성심기염적약물치료파점.방법 선용MOI위0.5 PFU/cell적가살기병독B3감염심기성섬유세포,이용세포형태급RT-PCR법검측세포내가살기병독B3 mRNA표체,학정가살기병독B3성공감염심기성섬유세포.이10nM뢰파매소간예,채용RT-PCR급Western blot검측대조조、병독조(MOI위0.5 PFU/cell)、뢰파매소조급병독+뢰파매소조eIF-4E표체.결과 MOI위0.5 PFU/cell적가살기병독B3감염심기성섬유세포,투사전경하가견세포형태개변,포장내가견병독과립.RT-PCR결과현시:감염후제1천、제2천、제3천급전대후제2천세포유병독mRNA표체.RT-PCR검측상술4조적eIF-4E/β-actin광밀도비치분별위:0.73±0.07,0.87±0.03,0.32±0.03,0.56±0.04;Western blot회도치분별위:0.79±0.09,1.35±0.12,0.55±0.04,0.62±0.07;RT-PCR급Western blot결과현시:병독조eIF-4E표체고우대조조,뢰파매소조화병독+뢰파매소조저우대조조급병독조(균P＜0.05).결론 가살기병독B3가감염심기성섬유세포,병사eIF-4E표체증가,뢰파매소가억제기표체,제시심기성섬유세포가능통과mTOR/eIF-4E신호통로삼여병독성심기염적발병궤제,뢰파매소대병독성심기염유잠재적치료작용.
