CAJ | 학술논문

胸膜肺炎放线杆菌(APP)是重要的猪呼吸道病原菌,给世界养猪业造成严重的经济损失.信号标签突变(STM)技术是在宿主动物体内鉴定病原菌毒力因子的高通量方法.通过体外传代选育出APP血清1型和3型萘啶酸抗性菌株,再以萘啶酸抗性菌株为受体菌,以携带mini-Tn10的标签质粒(pLOF/TAG1-48)的E.coli CC118 λ pir或S17-1λpir为供体菌,在或不在E.coli DH5α(pRK2073)的辅助下,进行三亲本或两亲本接合,通过抗性筛选、PCR和Southern杂交鉴定转座突变株.结果表明:体外萘啶酸加压传代很容易选育出萘啶酸抗性APP菌株,该抗性的产生与DNA促旋酶A亚基基因gyrA的突变有关.在APP与E. coli接合实验中,两亲本接合比三亲本接合操作更简单,效率也较高;APP不同菌株在接合和转座效率上存在很大差异,血清1型菌株高于血清3型菌株,3型标准菌株高于地方分离株JL03-R.本研究为APP STM突变体库的构建与毒力基因的鉴定奠定了基础.
흉막폐염방선간균(APP)시중요적저호흡도병원균,급세계양저업조성엄중적경제손실.신호표첨돌변(STM)기술시재숙주동물체내감정병원균독력인자적고통량방법.통과체외전대선육출APP혈청1형화3형내정산항성균주,재이내정산항성균주위수체균,이휴대mini-Tn10적표첨질립(pLOF/TAG1-48)적E.coli CC118 λ pir혹S17-1λpir위공체균,재혹불재E.coli DH5α(pRK2073)적보조하,진행삼친본혹량친본접합,통과항성사선、PCR화Southern잡교감정전좌돌변주.결과표명:체외내정산가압전대흔용역선육출내정산항성APP균주,해항성적산생여DNA촉선매A아기기인gyrA적돌변유관.재APP여E. coli접합실험중,량친본접합비삼친본접합조작경간단,효솔야교고;APP불동균주재접합화전좌효솔상존재흔대차이,혈청1형균주고우혈청3형균주,3형표준균주고우지방분리주JL03-R.본연구위APP STM돌변체고적구건여독력기인적감정전정료기출.