昆虫学报
昆蟲學報
곤충학보
ACTA ENTOMOLOGICA SINICA
2007年
11期
1111-1115
,共5页
尹隽%单梁%宋大新%钟江
尹雋%單樑%宋大新%鐘江
윤준%단량%송대신%종강
杆状病毒%增强蛋白%金属蛋白酶%围食膜%定点突变
桿狀病毒%增彊蛋白%金屬蛋白酶%圍食膜%定點突變
간상병독%증강단백%금속단백매%위식막%정점돌변
粉纹夜蛾颗粒体病毒(Trichoplusia ni granulovirus,TnGV)增强蛋白(enhancin)具有增强病毒感染力的作用.该蛋白包含一个多种杆状病毒增强蛋白都具有的保守结构域HELGH,是典型的金属蛋白酶锌离子结合域,但该结构域对增强蛋白生物活性的重要性尚未得到研究.本研究通过定点突变构建了该结构域的5个氨基酸分别突变为2种不同氨基酸的共10种增强蛋白突变体基因,并用杆状病毒载体进行了重组表达.活性测定发现,10种突变型增强蛋白大部分都丧失了野生型增强蛋白所具有的降解粉纹夜蛾幼虫围食膜粘蛋白的生物学功能,只有1种(第4位G突变为A)保留该生物学活性.这一结果表明锌离子结合域对增强蛋白生物活性具有重要作用,也提示增强蛋白确是一种金属蛋白酶.
粉紋夜蛾顆粒體病毒(Trichoplusia ni granulovirus,TnGV)增彊蛋白(enhancin)具有增彊病毒感染力的作用.該蛋白包含一箇多種桿狀病毒增彊蛋白都具有的保守結構域HELGH,是典型的金屬蛋白酶鋅離子結閤域,但該結構域對增彊蛋白生物活性的重要性尚未得到研究.本研究通過定點突變構建瞭該結構域的5箇氨基痠分彆突變為2種不同氨基痠的共10種增彊蛋白突變體基因,併用桿狀病毒載體進行瞭重組錶達.活性測定髮現,10種突變型增彊蛋白大部分都喪失瞭野生型增彊蛋白所具有的降解粉紋夜蛾幼蟲圍食膜粘蛋白的生物學功能,隻有1種(第4位G突變為A)保留該生物學活性.這一結果錶明鋅離子結閤域對增彊蛋白生物活性具有重要作用,也提示增彊蛋白確是一種金屬蛋白酶.
분문야아과립체병독(Trichoplusia ni granulovirus,TnGV)증강단백(enhancin)구유증강병독감염력적작용.해단백포함일개다충간상병독증강단백도구유적보수결구역HELGH,시전형적금속단백매자리자결합역,단해결구역대증강단백생물활성적중요성상미득도연구.본연구통과정점돌변구건료해결구역적5개안기산분별돌변위2충불동안기산적공10충증강단백돌변체기인,병용간상병독재체진행료중조표체.활성측정발현,10충돌변형증강단백대부분도상실료야생형증강단백소구유적강해분문야아유충위식막점단백적생물학공능,지유1충(제4위G돌변위A)보류해생물학활성.저일결과표명자리자결합역대증강단백생물활성구유중요작용,야제시증강단백학시일충금속단백매.
