南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2008年
1期
60-64
,共5页
吴伟东%方驰华%杨正心%包佳巾
吳偉東%方馳華%楊正心%包佳巾
오위동%방치화%양정심%포가건
RNA干扰%乳腺癌%表皮生长因子受体%小干扰RNA%成瘤率%肿瘤抑制率
RNA榦擾%乳腺癌%錶皮生長因子受體%小榦擾RNA%成瘤率%腫瘤抑製率
RNA간우%유선암%표피생장인자수체%소간우RNA%성류솔%종류억제솔
目的 探讨采用体外化学合成的小干扰RNA(siRNA)结合阳离子脂质体是否能有效在体转染乳腺癌细胞,以期为RNAi的在体实验研究提供实验数据和理论依据.方法 (1)建立裸鼠肿瘤动物模型,计算成瘤率.(2)体外转染乳腺癌细胞,常规动物接种,测量肿瘤体积和动物重量,计算肿瘤抑制率.(3)采用免疫组化和Western blotting技术测定肿瘤组织的表皮生长因子受体蛋白水平,采用Real-time PCR检测表皮生长因子受体基因水平,采用ELISA检测动物血清及肿瘤抽提蛋白中EGF含量.结果 MDA-MB-231、ZR-75细胞成瘤率依次为30.00%、88.89%,MDA-MB-231细胞的成瘤能力明显弱于ZR-75细胞.ELISA检测结果证实dsRNA-表皮生长因子受体可将血清及肿瘤组织抽提蛋白中的EGF含量分别降低16.77%、12.59%.Real-time PCR结果表明dsRNA-表皮生长因子受体可将表皮生长因子受体基因表达下调21.05%.结论 (1)采用体外化学合成的siRNA结合阳离子脂质体可有效在体转染乳腺癌细胞.(2)在体实验中RNAi效应持续的时间明显长于体外实验.(3)针对表皮生长因子受体基因序列设计的siRNA可作为极具开发前途的抗肿瘤新药,其在体实验中触发RNAi可能的作用机制尚需进一步深入探讨.
目的 探討採用體外化學閤成的小榦擾RNA(siRNA)結閤暘離子脂質體是否能有效在體轉染乳腺癌細胞,以期為RNAi的在體實驗研究提供實驗數據和理論依據.方法 (1)建立裸鼠腫瘤動物模型,計算成瘤率.(2)體外轉染乳腺癌細胞,常規動物接種,測量腫瘤體積和動物重量,計算腫瘤抑製率.(3)採用免疫組化和Western blotting技術測定腫瘤組織的錶皮生長因子受體蛋白水平,採用Real-time PCR檢測錶皮生長因子受體基因水平,採用ELISA檢測動物血清及腫瘤抽提蛋白中EGF含量.結果 MDA-MB-231、ZR-75細胞成瘤率依次為30.00%、88.89%,MDA-MB-231細胞的成瘤能力明顯弱于ZR-75細胞.ELISA檢測結果證實dsRNA-錶皮生長因子受體可將血清及腫瘤組織抽提蛋白中的EGF含量分彆降低16.77%、12.59%.Real-time PCR結果錶明dsRNA-錶皮生長因子受體可將錶皮生長因子受體基因錶達下調21.05%.結論 (1)採用體外化學閤成的siRNA結閤暘離子脂質體可有效在體轉染乳腺癌細胞.(2)在體實驗中RNAi效應持續的時間明顯長于體外實驗.(3)針對錶皮生長因子受體基因序列設計的siRNA可作為極具開髮前途的抗腫瘤新藥,其在體實驗中觸髮RNAi可能的作用機製尚需進一步深入探討.
목적 탐토채용체외화학합성적소간우RNA(siRNA)결합양리자지질체시부능유효재체전염유선암세포,이기위RNAi적재체실험연구제공실험수거화이론의거.방법 (1)건립라서종류동물모형,계산성류솔.(2)체외전염유선암세포,상규동물접충,측량종류체적화동물중량,계산종류억제솔.(3)채용면역조화화Western blotting기술측정종류조직적표피생장인자수체단백수평,채용Real-time PCR검측표피생장인자수체기인수평,채용ELISA검측동물혈청급종류추제단백중EGF함량.결과 MDA-MB-231、ZR-75세포성류솔의차위30.00%、88.89%,MDA-MB-231세포적성류능력명현약우ZR-75세포.ELISA검측결과증실dsRNA-표피생장인자수체가장혈청급종류조직추제단백중적EGF함량분별강저16.77%、12.59%.Real-time PCR결과표명dsRNA-표피생장인자수체가장표피생장인자수체기인표체하조21.05%.결론 (1)채용체외화학합성적siRNA결합양리자지질체가유효재체전염유선암세포.(2)재체실험중RNAi효응지속적시간명현장우체외실험.(3)침대표피생장인자수체기인서렬설계적siRNA가작위겁구개발전도적항종류신약,기재체실험중촉발RNAi가능적작용궤제상수진일보심입탐토.
