中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2007年
10期
17-21
,共5页
模拟微重力条件%WB-F344肝干细胞%RCCS
模擬微重力條件%WB-F344肝榦細胞%RCCS
모의미중력조건%WB-F344간간세포%RCCS
研究大鼠WB-F344肝干细胞在旋转式细胞培养系统(RCCS)中培养进行细胞大规模扩增并保持干细胞的特性的可能性,为干细胞治疗疾病及肝组织工程提供理想的细胞来源.以WB-F344肝干细胞在RCCS中培养,以平面单层培养为对照,在培养后不同时间分别进行形态观察、流式细胞仪测细胞周期、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝干细胞特异性基因甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)的表达,免疫荧光染色检测AFP、ALB蛋白的表达.结果表明,RCCS培养的WB-F344细胞粘附在Cytodex-3微载体上状态生长良好,细胞增殖较平面培养有明显增加;RT-PCR和免疫荧光染色检测结果一致:模拟微重力培养组AFP的mRNA表达强度及AFP阳性细胞均显著高于平面培养组,而ALB mRNA表达强度和ALB阳性细胞均低于对照组.说明模拟微重力培养条件下,能较好地维持肝干细胞特性,进一步证明这种培养体系是一种理想的肝干细胞培养模式.
研究大鼠WB-F344肝榦細胞在鏇轉式細胞培養繫統(RCCS)中培養進行細胞大規模擴增併保持榦細胞的特性的可能性,為榦細胞治療疾病及肝組織工程提供理想的細胞來源.以WB-F344肝榦細胞在RCCS中培養,以平麵單層培養為對照,在培養後不同時間分彆進行形態觀察、流式細胞儀測細胞週期、逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測肝榦細胞特異性基因甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)的錶達,免疫熒光染色檢測AFP、ALB蛋白的錶達.結果錶明,RCCS培養的WB-F344細胞粘附在Cytodex-3微載體上狀態生長良好,細胞增殖較平麵培養有明顯增加;RT-PCR和免疫熒光染色檢測結果一緻:模擬微重力培養組AFP的mRNA錶達彊度及AFP暘性細胞均顯著高于平麵培養組,而ALB mRNA錶達彊度和ALB暘性細胞均低于對照組.說明模擬微重力培養條件下,能較好地維持肝榦細胞特性,進一步證明這種培養體繫是一種理想的肝榦細胞培養模式.
연구대서WB-F344간간세포재선전식세포배양계통(RCCS)중배양진행세포대규모확증병보지간세포적특성적가능성,위간세포치료질병급간조직공정제공이상적세포래원.이WB-F344간간세포재RCCS중배양,이평면단층배양위대조,재배양후불동시간분별진행형태관찰、류식세포의측세포주기、역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측간간세포특이성기인갑태단백(AFP)화백단백(ALB)적표체,면역형광염색검측AFP、ALB단백적표체.결과표명,RCCS배양적WB-F344세포점부재Cytodex-3미재체상상태생장량호,세포증식교평면배양유명현증가;RT-PCR화면역형광염색검측결과일치:모의미중력배양조AFP적mRNA표체강도급AFP양성세포균현저고우평면배양조,이ALB mRNA표체강도화ALB양성세포균저우대조조.설명모의미중력배양조건하,능교호지유지간간세포특성,진일보증명저충배양체계시일충이상적간간세포배양모식.