中国临床康复
中國臨床康複
중국림상강복
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATION
2006年
9期
21-23
,共3页
李克%马岚%韩雪飞%刘瑞敏%许煊慧%邢莹
李剋%馬嵐%韓雪飛%劉瑞敏%許煊慧%邢瑩
리극%마람%한설비%류서민%허훤혜%형형
干细胞%荧光%基因%转染%脂质体
榦細胞%熒光%基因%轉染%脂質體
간세포%형광%기인%전염%지질체
目的:建立携带示踪标记的人骨髓间充质干细胞,并将其向神经元样细胞定向诱导分化.方法:实验于2003-10/2005-01在郑州大学干细胞研究中心完成.用阳离子脂质体转染法将增强型绿色荧光蛋白基因转入人骨髓间充质干细胞中,然后用表皮生长因子和碱性成纤维生长因子联合诱导法将其向神经元样细胞诱导分化,并用反转录聚合酶链反应法对诱导后的细胞进行鉴定.结果:①转染48 h后,在荧光显微镜下观察,对照组的人骨髓间充质干细胞不发荧光,而实验组的人骨髓间充质干细胞开始发荧光,经G418筛选后得到稳定表达增强型绿色荧光蛋白的人骨髓间充质干细胞.②转染后的人骨髓间充质干细胞经重组人表皮生长因子和碱性成纤维生长因子的联合诱导后,较多细胞出现了典型的神经元样形态,经反转录聚合酶链反应法证明,神经元特征性蛋白微管相关蛋白2和神经丝亚单位-M表达增强.结论:应用阳离子脂质体转染法将增强型绿色荧光蛋白基因转入人骨髓间充质干细胞中可获得稳定表达,转染后的人骨髓间充质干细胞,经表皮生长因子和碱性成纤维生长因子联合诱导后可以向神经元样细胞定向分化.
目的:建立攜帶示蹤標記的人骨髓間充質榦細胞,併將其嚮神經元樣細胞定嚮誘導分化.方法:實驗于2003-10/2005-01在鄭州大學榦細胞研究中心完成.用暘離子脂質體轉染法將增彊型綠色熒光蛋白基因轉入人骨髓間充質榦細胞中,然後用錶皮生長因子和堿性成纖維生長因子聯閤誘導法將其嚮神經元樣細胞誘導分化,併用反轉錄聚閤酶鏈反應法對誘導後的細胞進行鑒定.結果:①轉染48 h後,在熒光顯微鏡下觀察,對照組的人骨髓間充質榦細胞不髮熒光,而實驗組的人骨髓間充質榦細胞開始髮熒光,經G418篩選後得到穩定錶達增彊型綠色熒光蛋白的人骨髓間充質榦細胞.②轉染後的人骨髓間充質榦細胞經重組人錶皮生長因子和堿性成纖維生長因子的聯閤誘導後,較多細胞齣現瞭典型的神經元樣形態,經反轉錄聚閤酶鏈反應法證明,神經元特徵性蛋白微管相關蛋白2和神經絲亞單位-M錶達增彊.結論:應用暘離子脂質體轉染法將增彊型綠色熒光蛋白基因轉入人骨髓間充質榦細胞中可穫得穩定錶達,轉染後的人骨髓間充質榦細胞,經錶皮生長因子和堿性成纖維生長因子聯閤誘導後可以嚮神經元樣細胞定嚮分化.
목적:건립휴대시종표기적인골수간충질간세포,병장기향신경원양세포정향유도분화.방법:실험우2003-10/2005-01재정주대학간세포연구중심완성.용양리자지질체전염법장증강형록색형광단백기인전입인골수간충질간세포중,연후용표피생장인자화감성성섬유생장인자연합유도법장기향신경원양세포유도분화,병용반전록취합매련반응법대유도후적세포진행감정.결과:①전염48 h후,재형광현미경하관찰,대조조적인골수간충질간세포불발형광,이실험조적인골수간충질간세포개시발형광,경G418사선후득도은정표체증강형록색형광단백적인골수간충질간세포.②전염후적인골수간충질간세포경중조인표피생장인자화감성성섬유생장인자적연합유도후,교다세포출현료전형적신경원양형태,경반전록취합매련반응법증명,신경원특정성단백미관상관단백2화신경사아단위-M표체증강.결론:응용양리자지질체전염법장증강형록색형광단백기인전입인골수간충질간세포중가획득은정표체,전염후적인골수간충질간세포,경표피생장인자화감성성섬유생장인자연합유도후가이향신경원양세포정향분화.
