中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2006年
2期
237-239
,共3页
刘建巨%吴雅臻%李光宇%范斌
劉建巨%吳雅臻%李光宇%範斌
류건거%오아진%리광우%범빈
Calreticulin(120～180aa)%COS-7细胞%基因克隆%真核表达
Calreticulin(120～180aa)%COS-7細胞%基因剋隆%真覈錶達
Calreticulin(120～180aa)%COS-7세포%기인극륭%진핵표체
目的构建真核表达质粒PcDNA3.1(+)-带有Vasostatin自身信号肽的Calreticulin(120～180 aa)并了解其在真核细胞内的表达.方法将带有Vasostatin自身信号肽的Calreticulin(120～180 aa)的RT-PCR产物克隆至pcDNA31(+)真核表达载体上,经酶切鉴定及测序分析证明构建成功后,以脂质体介导法转染真核细胞COS-7,并行Western法检测.结果成功构建了真核表达质粒PcDNA3.1(+)-带有Vasostatin自身信号肽的Calreticulin(120～180 aa),将之转染体外的真核COS-7细胞后,在其上清液中,检测到目的蛋白质.结论该构建的质粒可在真核细胞中表达目的蛋白质,这为基因治疗视网膜新生血管类病奠定了一定基础.
目的構建真覈錶達質粒PcDNA3.1(+)-帶有Vasostatin自身信號肽的Calreticulin(120～180 aa)併瞭解其在真覈細胞內的錶達.方法將帶有Vasostatin自身信號肽的Calreticulin(120～180 aa)的RT-PCR產物剋隆至pcDNA31(+)真覈錶達載體上,經酶切鑒定及測序分析證明構建成功後,以脂質體介導法轉染真覈細胞COS-7,併行Western法檢測.結果成功構建瞭真覈錶達質粒PcDNA3.1(+)-帶有Vasostatin自身信號肽的Calreticulin(120～180 aa),將之轉染體外的真覈COS-7細胞後,在其上清液中,檢測到目的蛋白質.結論該構建的質粒可在真覈細胞中錶達目的蛋白質,這為基因治療視網膜新生血管類病奠定瞭一定基礎.
목적구건진핵표체질립PcDNA3.1(+)-대유Vasostatin자신신호태적Calreticulin(120～180 aa)병료해기재진핵세포내적표체.방법장대유Vasostatin자신신호태적Calreticulin(120～180 aa)적RT-PCR산물극륭지pcDNA31(+)진핵표체재체상,경매절감정급측서분석증명구건성공후,이지질체개도법전염진핵세포COS-7,병행Western법검측.결과성공구건료진핵표체질립PcDNA3.1(+)-대유Vasostatin자신신호태적Calreticulin(120～180 aa),장지전염체외적진핵COS-7세포후,재기상청액중,검측도목적단백질.결론해구건적질립가재진핵세포중표체목적단백질,저위기인치료시망막신생혈관류병전정료일정기출.
