中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2006年
1期
15-21
,共7页
张海玲%张永富%杨少光%田征%黄志刚%赵钧铭%张君奎
張海玲%張永富%楊少光%田徵%黃誌剛%趙鈞銘%張君奎
장해령%장영부%양소광%전정%황지강%조균명%장군규
血细胞生成%基质细胞%微载体%中空纤维%c-kit基因
血細胞生成%基質細胞%微載體%中空纖維%c-kit基因
혈세포생성%기질세포%미재체%중공섬유%c-kit기인
目的:采用细胞工程技术探索造血细胞体外扩增技术以维持其自我更新潜能,抑制过度分化.方法:首先建立微载体-基质细胞体外造血模型(G1组,即瓶培养模式),设置单纯微载体-基质细胞培养(G2组)和单纯骨髓细胞液体悬浮培养(G3组)作对照.检测各组粒系-巨噬系造血祖细胞集落产率(CFU-GM/105).自行设计1对引物,以检测Balb/c小鼠原始造血细胞c-kit基因mRNA表达水平.试用中空纤维模拟血管灌注功能(Gh组,即中空纤维灌注模式),以G1、G2、G3作对照,并对各组培养效果进行评价.结果:微载体-基质细胞体外造血模型实验结果显示:小鼠骨髓细胞培养2周后,CFU-GM/105检测G1组比G3组高7.7倍(P<0.05),是2个对照组(G2+G3)集落产率总和的1.9倍.原始造血细胞c-kitmRNA表达水平:模型G1组比G2组高3.7倍,比G3组高62.3倍,且差异均显著.在成功建立微载体-基质细胞体外造血模型基础上进行中空纤维灌注培养实验,CFU-GM/105检测显示:Gh组比G3组高4.6倍,并且略高于G2组;Gh组与G1组集落产率差别不明显.在原始造血细胞c-kitmRNA表达水平上Gh组最高,从Gh、G1、G2到G2依次呈下降趋势.结论:在没有外加细胞因子的条件下,微载体-基质细胞和中空纤维灌注造血模型可抑制造血干、祖细胞过度分化与耗竭,维持其c-kit较高的表达水平.
目的:採用細胞工程技術探索造血細胞體外擴增技術以維持其自我更新潛能,抑製過度分化.方法:首先建立微載體-基質細胞體外造血模型(G1組,即瓶培養模式),設置單純微載體-基質細胞培養(G2組)和單純骨髓細胞液體懸浮培養(G3組)作對照.檢測各組粒繫-巨噬繫造血祖細胞集落產率(CFU-GM/105).自行設計1對引物,以檢測Balb/c小鼠原始造血細胞c-kit基因mRNA錶達水平.試用中空纖維模擬血管灌註功能(Gh組,即中空纖維灌註模式),以G1、G2、G3作對照,併對各組培養效果進行評價.結果:微載體-基質細胞體外造血模型實驗結果顯示:小鼠骨髓細胞培養2週後,CFU-GM/105檢測G1組比G3組高7.7倍(P<0.05),是2箇對照組(G2+G3)集落產率總和的1.9倍.原始造血細胞c-kitmRNA錶達水平:模型G1組比G2組高3.7倍,比G3組高62.3倍,且差異均顯著.在成功建立微載體-基質細胞體外造血模型基礎上進行中空纖維灌註培養實驗,CFU-GM/105檢測顯示:Gh組比G3組高4.6倍,併且略高于G2組;Gh組與G1組集落產率差彆不明顯.在原始造血細胞c-kitmRNA錶達水平上Gh組最高,從Gh、G1、G2到G2依次呈下降趨勢.結論:在沒有外加細胞因子的條件下,微載體-基質細胞和中空纖維灌註造血模型可抑製造血榦、祖細胞過度分化與耗竭,維持其c-kit較高的錶達水平.
목적:채용세포공정기술탐색조혈세포체외확증기술이유지기자아경신잠능,억제과도분화.방법:수선건립미재체-기질세포체외조혈모형(G1조,즉병배양모식),설치단순미재체-기질세포배양(G2조)화단순골수세포액체현부배양(G3조)작대조.검측각조립계-거서계조혈조세포집락산솔(CFU-GM/105).자행설계1대인물,이검측Balb/c소서원시조혈세포c-kit기인mRNA표체수평.시용중공섬유모의혈관관주공능(Gh조,즉중공섬유관주모식),이G1、G2、G3작대조,병대각조배양효과진행평개.결과:미재체-기질세포체외조혈모형실험결과현시:소서골수세포배양2주후,CFU-GM/105검측G1조비G3조고7.7배(P<0.05),시2개대조조(G2+G3)집락산솔총화적1.9배.원시조혈세포c-kitmRNA표체수평:모형G1조비G2조고3.7배,비G3조고62.3배,차차이균현저.재성공건립미재체-기질세포체외조혈모형기출상진행중공섬유관주배양실험,CFU-GM/105검측현시:Gh조비G3조고4.6배,병차략고우G2조;Gh조여G1조집락산솔차별불명현.재원시조혈세포c-kitmRNA표체수평상Gh조최고,종Gh、G1、G2도G2의차정하강추세.결론:재몰유외가세포인자적조건하,미재체-기질세포화중공섬유관주조혈모형가억제조혈간、조세포과도분화여모갈,유지기c-kit교고적표체수평.