华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2006年
1期
18-22
,共5页
胡晓勇%陈晓春%朱朝辉%曾甫清%鲁功成
鬍曉勇%陳曉春%硃朝輝%曾甫清%魯功成
호효용%진효춘%주조휘%증보청%로공성
PED/PEA-15蛋白%前列腺癌%细胞凋亡
PED/PEA-15蛋白%前列腺癌%細胞凋亡
PED/PEA-15단백%전렬선암%세포조망
目的通过构建PED/PEA-15特异的siRNA载体,探讨PED/PEA-15对前列腺癌细胞(PC-3)凋亡的影响.方法应用免疫组化SP法检测前列腺癌和正常前列腺组织中PED/PEA-15的表达;用RT-PCR法检测PC-3细胞中PED/PEA-15的表达.体外合成PED/PEA-15特异性siRNA序列,并克隆入真核表达载体psiRNA-hH1neo.以脂质体法转染psiRNA-PED/PEA-15至PC-3细胞中,以RT-PCR和Western blot法检测psiRNA-PED/PEA-15对PED/PEA-15表达的影响;用MTT和流式细胞术检测其对PC-3细胞凋亡的影响.结果免疫组化和RT-PCR均显示PED/PEA-15在前列腺癌中高表达;正常前列腺组织没有或只有很弱的表达.酶切和DNA测序证实合成的siRNA基因序列正确,并已被准确克隆入psiRNA-hH1neo载体.psiRNA-PED/PEA-15可特异性抑制PC-3细胞中PED/PEA-15的表达.转染psiRNA-PED/PEA-15的PC-3细胞凋亡显著增加(P＜0.05).结论PED/PEA-15可阻抑前列腺癌细胞凋亡,其表达对前列腺癌的发展有重要作用.
目的通過構建PED/PEA-15特異的siRNA載體,探討PED/PEA-15對前列腺癌細胞(PC-3)凋亡的影響.方法應用免疫組化SP法檢測前列腺癌和正常前列腺組織中PED/PEA-15的錶達;用RT-PCR法檢測PC-3細胞中PED/PEA-15的錶達.體外閤成PED/PEA-15特異性siRNA序列,併剋隆入真覈錶達載體psiRNA-hH1neo.以脂質體法轉染psiRNA-PED/PEA-15至PC-3細胞中,以RT-PCR和Western blot法檢測psiRNA-PED/PEA-15對PED/PEA-15錶達的影響;用MTT和流式細胞術檢測其對PC-3細胞凋亡的影響.結果免疫組化和RT-PCR均顯示PED/PEA-15在前列腺癌中高錶達;正常前列腺組織沒有或隻有很弱的錶達.酶切和DNA測序證實閤成的siRNA基因序列正確,併已被準確剋隆入psiRNA-hH1neo載體.psiRNA-PED/PEA-15可特異性抑製PC-3細胞中PED/PEA-15的錶達.轉染psiRNA-PED/PEA-15的PC-3細胞凋亡顯著增加(P＜0.05).結論PED/PEA-15可阻抑前列腺癌細胞凋亡,其錶達對前列腺癌的髮展有重要作用.
목적통과구건PED/PEA-15특이적siRNA재체,탐토PED/PEA-15대전렬선암세포(PC-3)조망적영향.방법응용면역조화SP법검측전렬선암화정상전렬선조직중PED/PEA-15적표체;용RT-PCR법검측PC-3세포중PED/PEA-15적표체.체외합성PED/PEA-15특이성siRNA서렬,병극륭입진핵표체재체psiRNA-hH1neo.이지질체법전염psiRNA-PED/PEA-15지PC-3세포중,이RT-PCR화Western blot법검측psiRNA-PED/PEA-15대PED/PEA-15표체적영향;용MTT화류식세포술검측기대PC-3세포조망적영향.결과면역조화화RT-PCR균현시PED/PEA-15재전렬선암중고표체;정상전렬선조직몰유혹지유흔약적표체.매절화DNA측서증실합성적siRNA기인서렬정학,병이피준학극륭입psiRNA-hH1neo재체.psiRNA-PED/PEA-15가특이성억제PC-3세포중PED/PEA-15적표체.전염psiRNA-PED/PEA-15적PC-3세포조망현저증가(P＜0.05).결론PED/PEA-15가조억전렬선암세포조망,기표체대전렬선암적발전유중요작용.
