中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2001年
2期
209-214
,共6页
韩为东%于力%楼方定%王全顺%赵瑜%史子江%焦宏远%周建军
韓為東%于力%樓方定%王全順%趙瑜%史子江%焦宏遠%週建軍
한위동%우력%루방정%왕전순%조유%사자강%초굉원%주건군
白血病%相关基因%LRP16%重组蛋白%原核表达
白血病%相關基因%LRP16%重組蛋白%原覈錶達
백혈병%상관기인%LRP16%중조단백%원핵표체
克隆一个与白血病复发相关基因(LRP16)的全长cDNA序列,对其进行染色体定位、组织表达谱分析,并对该基因编码蛋白质进行原核表达.首先用获得的一段3kb DNA 片段在NCBI提供的hESTs数据库中进行电子杂交并对重叠克隆片段组装,再设计引物进行cDNA末端快速扩增(RACE技术).采用Northern印迹方法进行组织表达分析.以高通量基因组序列(HTGS)数据库为基础进行染色体定位.对构建的克隆菌用IPTG诱导重组蛋白表达后进行SDS-PAGE,同时对重组体测序确证.钓取了该基因全长cDNA、推导所编码的氨基酸序列,并将该基因定位于染色体11q12.2.原核表达筛选获得了该基因重组子的一个缺失体.对LRP16基因全长cDNA的序列分析提示,该基因可能编码两种N端不同的蛋白质,且该基因的转录本可能存在一种丰度较低的剪接体.
剋隆一箇與白血病複髮相關基因(LRP16)的全長cDNA序列,對其進行染色體定位、組織錶達譜分析,併對該基因編碼蛋白質進行原覈錶達.首先用穫得的一段3kb DNA 片段在NCBI提供的hESTs數據庫中進行電子雜交併對重疊剋隆片段組裝,再設計引物進行cDNA末耑快速擴增(RACE技術).採用Northern印跡方法進行組織錶達分析.以高通量基因組序列(HTGS)數據庫為基礎進行染色體定位.對構建的剋隆菌用IPTG誘導重組蛋白錶達後進行SDS-PAGE,同時對重組體測序確證.釣取瞭該基因全長cDNA、推導所編碼的氨基痠序列,併將該基因定位于染色體11q12.2.原覈錶達篩選穫得瞭該基因重組子的一箇缺失體.對LRP16基因全長cDNA的序列分析提示,該基因可能編碼兩種N耑不同的蛋白質,且該基因的轉錄本可能存在一種豐度較低的剪接體.
극륭일개여백혈병복발상관기인(LRP16)적전장cDNA서렬,대기진행염색체정위、조직표체보분석,병대해기인편마단백질진행원핵표체.수선용획득적일단3kb DNA 편단재NCBI제공적hESTs수거고중진행전자잡교병대중첩극륭편단조장,재설계인물진행cDNA말단쾌속확증(RACE기술).채용Northern인적방법진행조직표체분석.이고통량기인조서렬(HTGS)수거고위기출진행염색체정위.대구건적극륭균용IPTG유도중조단백표체후진행SDS-PAGE,동시대중조체측서학증.조취료해기인전장cDNA、추도소편마적안기산서렬,병장해기인정위우염색체11q12.2.원핵표체사선획득료해기인중조자적일개결실체.대LRP16기인전장cDNA적서렬분석제시,해기인가능편마량충N단불동적단백질,차해기인적전록본가능존재일충봉도교저적전접체.
