核农学报
覈農學報
핵농학보
ACTA AGRICULTURAE NUCLEATAE SINICA
2001年
2期
81-85
,共5页
达克东%金德敏%伏建民%王斌%束怀瑞%李雅志
達剋東%金德敏%伏建民%王斌%束懷瑞%李雅誌
체극동%금덕민%복건민%왕빈%속부서%리아지
苹果%体细胞胚胎%体细胞无性系变异%RAPD
蘋果%體細胞胚胎%體細胞無性繫變異%RAPD
평과%체세포배태%체세포무성계변이%RAPD
以苹果栽培品种Gala试管苗叶片为材料,将叶片刺伤后接种于附加了BA1mg/L、2,4-D 0.5mg/L和NAA 5mg/L的MS培养基,黑暗培养7d后转移至附加BA1mg/L的MS培养基,继续暗培养40d,97%叶片发生直接类型体细胞胚胎,单位叶片平均再生体细胞胚胎25个.对来自同一植株上的前3片展开叶中的1片叶进行组织培养,再生得到15株直接体细胞胚胎发生、植株再生后代.应用随机扩增多态性DNA(RAPD)分析技术,以供体(原初供体)为对照进行了供体和再生体间及再生体彼此之间体细胞无性系变异研究,没有观察到供体和再生体间及再生体彼此之间有DNA多态性;接着用同样的方法对上述15株体细胞胚胎植株随机抽取7个单株单叶进行培养,得到二代直接体细胞胚胎植株,分别从7个单株单叶再生的二代植株中各随机抽取1株,再次用RAPD方法进行原初供体和二代再生体间及二代再生体之间体细胞无性系变异分析,结果二代直接体细胞胚胎植株5和引物OPF-06组合中出现一条多态带,其分子量约为900bp,命名为OPF-06900,重复3次多态性稳定.结果表明,苹果离体叶片直接体细胞胚胎发生途径再生植株的体细胞无性系变异率接近自然变异率.
以蘋果栽培品種Gala試管苗葉片為材料,將葉片刺傷後接種于附加瞭BA1mg/L、2,4-D 0.5mg/L和NAA 5mg/L的MS培養基,黑暗培養7d後轉移至附加BA1mg/L的MS培養基,繼續暗培養40d,97%葉片髮生直接類型體細胞胚胎,單位葉片平均再生體細胞胚胎25箇.對來自同一植株上的前3片展開葉中的1片葉進行組織培養,再生得到15株直接體細胞胚胎髮生、植株再生後代.應用隨機擴增多態性DNA(RAPD)分析技術,以供體(原初供體)為對照進行瞭供體和再生體間及再生體彼此之間體細胞無性繫變異研究,沒有觀察到供體和再生體間及再生體彼此之間有DNA多態性;接著用同樣的方法對上述15株體細胞胚胎植株隨機抽取7箇單株單葉進行培養,得到二代直接體細胞胚胎植株,分彆從7箇單株單葉再生的二代植株中各隨機抽取1株,再次用RAPD方法進行原初供體和二代再生體間及二代再生體之間體細胞無性繫變異分析,結果二代直接體細胞胚胎植株5和引物OPF-06組閤中齣現一條多態帶,其分子量約為900bp,命名為OPF-06900,重複3次多態性穩定.結果錶明,蘋果離體葉片直接體細胞胚胎髮生途徑再生植株的體細胞無性繫變異率接近自然變異率.
이평과재배품충Gala시관묘협편위재료,장협편자상후접충우부가료BA1mg/L、2,4-D 0.5mg/L화NAA 5mg/L적MS배양기,흑암배양7d후전이지부가BA1mg/L적MS배양기,계속암배양40d,97%협편발생직접류형체세포배태,단위협편평균재생체세포배태25개.대래자동일식주상적전3편전개협중적1편협진행조직배양,재생득도15주직접체세포배태발생、식주재생후대.응용수궤확증다태성DNA(RAPD)분석기술,이공체(원초공체)위대조진행료공체화재생체간급재생체피차지간체세포무성계변이연구,몰유관찰도공체화재생체간급재생체피차지간유DNA다태성;접착용동양적방법대상술15주체세포배태식주수궤추취7개단주단협진행배양,득도이대직접체세포배태식주,분별종7개단주단협재생적이대식주중각수궤추취1주,재차용RAPD방법진행원초공체화이대재생체간급이대재생체지간체세포무성계변이분석,결과이대직접체세포배태식주5화인물OPF-06조합중출현일조다태대,기분자량약위900bp,명명위OPF-06900,중복3차다태성은정.결과표명,평과리체협편직접체세포배태발생도경재생식주적체세포무성계변이솔접근자연변이솔.