中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2002年
7期
457-460
,共4页
高全立%张叔人%周春霞%马文波%张书岭%王东梅%张友会
高全立%張叔人%週春霞%馬文波%張書嶺%王東梅%張友會
고전립%장숙인%주춘하%마문파%장서령%왕동매%장우회
GM-CSF%基因表达%免疫治疗
GM-CSF%基因錶達%免疫治療
GM-CSF%기인표체%면역치료
目的:构建小鼠GM-CSF基因的高效真核表达载体,筛选导入该载体后高水平表达GM-CSF的小鼠淋巴瘤细胞系RMA,并探讨转GM-CSF基因瘤苗治疗小鼠T淋巴细胞瘤的方法.方法:PCR扩增小鼠GM-CSF cDNA 3'端770 bp的片段,将其插入真核表达载体pcDNA3;用电穿孔法将构建的载体导入小鼠淋巴瘤细胞系RMA,有限稀释法制备单个细胞克隆,经RT-PCR、骨髓祖细胞增殖实验和集落形成实验筛选相对高表达GM-CSF的RMA克隆,该克隆细胞经丝裂霉素灭活后免疫小鼠以诱导其产生抵抗RMA肿瘤细胞再攻击的能力.结果:构建的重组质粒含有预期片段,插入方向正确,核酸序列无误;且获得了高表达GM-CSF的RMA克隆,将其用丝裂霉素灭活免疫小鼠后使它们产生了抗肿瘤免疫保护力.结论:转GM-CSF基因瘤苗可能作为有效的抗T淋巴细胞瘤瘤苗.
目的:構建小鼠GM-CSF基因的高效真覈錶達載體,篩選導入該載體後高水平錶達GM-CSF的小鼠淋巴瘤細胞繫RMA,併探討轉GM-CSF基因瘤苗治療小鼠T淋巴細胞瘤的方法.方法:PCR擴增小鼠GM-CSF cDNA 3'耑770 bp的片段,將其插入真覈錶達載體pcDNA3;用電穿孔法將構建的載體導入小鼠淋巴瘤細胞繫RMA,有限稀釋法製備單箇細胞剋隆,經RT-PCR、骨髓祖細胞增殖實驗和集落形成實驗篩選相對高錶達GM-CSF的RMA剋隆,該剋隆細胞經絲裂黴素滅活後免疫小鼠以誘導其產生牴抗RMA腫瘤細胞再攻擊的能力.結果:構建的重組質粒含有預期片段,插入方嚮正確,覈痠序列無誤;且穫得瞭高錶達GM-CSF的RMA剋隆,將其用絲裂黴素滅活免疫小鼠後使它們產生瞭抗腫瘤免疫保護力.結論:轉GM-CSF基因瘤苗可能作為有效的抗T淋巴細胞瘤瘤苗.
목적:구건소서GM-CSF기인적고효진핵표체재체,사선도입해재체후고수평표체GM-CSF적소서림파류세포계RMA,병탐토전GM-CSF기인류묘치료소서T림파세포류적방법.방법:PCR확증소서GM-CSF cDNA 3'단770 bp적편단,장기삽입진핵표체재체pcDNA3;용전천공법장구건적재체도입소서림파류세포계RMA,유한희석법제비단개세포극륭,경RT-PCR、골수조세포증식실험화집락형성실험사선상대고표체GM-CSF적RMA극륭,해극륭세포경사렬매소멸활후면역소서이유도기산생저항RMA종류세포재공격적능력.결과:구건적중조질립함유예기편단,삽입방향정학,핵산서렬무오;차획득료고표체GM-CSF적RMA극륭,장기용사렬매소멸활면역소서후사타문산생료항종류면역보호력.결론:전GM-CSF기인류묘가능작위유효적항T림파세포류류묘.
