清华大学学报(自然科学版)
清華大學學報(自然科學版)
청화대학학보(자연과학판)
Journal of Tsinghua University
2001年
12期
62-64
,共3页
蒋宇扬%张歧山%张玉魁%万荣%赵玉芬
蔣宇颺%張歧山%張玉魁%萬榮%趙玉芬
장우양%장기산%장옥괴%만영%조옥분
白眉蝮蛇%降纤酶%分离纯化%性质
白眉蝮蛇%降纖酶%分離純化%性質
백미복사%강섬매%분리순화%성질
蛇毒蛋白对抑制血栓形成和溶解血栓具有较好的疗效,但由于得不到性质稳定、组分单一的酶蛋白,影响了其临床效果.该研究通过亲和层析方法,从长白山白眉蝮蛇乌苏里种蛇毒中分离提纯到SDS-PAGE图谱为单一组分糖蛋白--降纤酶,相对分子质量约3.6×104. 该酶具有体外凝血、体内抗凝作用.等电点约为4.25. HPLC分析结果表明其纯度为99%. 最适温度为70 ℃, 最适pH=8.0. 动力学研究表明该酶为一Michaelis-Menten酶, Michaelis常数为0.320 mmol/L, 最大反应速度为0.117 μmol/min. EDTA, Mg2+, Cu2+对其有抑制作用.测定该酶N端20个氨基酸的序列是ValIleGluGluAspGluCysAsnIleAsnGluHisArgPheLeu, 与其他的蛇毒类凝血酶有高度同源性.
蛇毒蛋白對抑製血栓形成和溶解血栓具有較好的療效,但由于得不到性質穩定、組分單一的酶蛋白,影響瞭其臨床效果.該研究通過親和層析方法,從長白山白眉蝮蛇烏囌裏種蛇毒中分離提純到SDS-PAGE圖譜為單一組分糖蛋白--降纖酶,相對分子質量約3.6×104. 該酶具有體外凝血、體內抗凝作用.等電點約為4.25. HPLC分析結果錶明其純度為99%. 最適溫度為70 ℃, 最適pH=8.0. 動力學研究錶明該酶為一Michaelis-Menten酶, Michaelis常數為0.320 mmol/L, 最大反應速度為0.117 μmol/min. EDTA, Mg2+, Cu2+對其有抑製作用.測定該酶N耑20箇氨基痠的序列是ValIleGluGluAspGluCysAsnIleAsnGluHisArgPheLeu, 與其他的蛇毒類凝血酶有高度同源性.
사독단백대억제혈전형성화용해혈전구유교호적료효,단유우득불도성질은정、조분단일적매단백,영향료기림상효과.해연구통과친화층석방법,종장백산백미복사오소리충사독중분리제순도SDS-PAGE도보위단일조분당단백--강섬매,상대분자질량약3.6×104. 해매구유체외응혈、체내항응작용.등전점약위4.25. HPLC분석결과표명기순도위99%. 최괄온도위70 ℃, 최괄pH=8.0. 동역학연구표명해매위일Michaelis-Menten매, Michaelis상수위0.320 mmol/L, 최대반응속도위0.117 μmol/min. EDTA, Mg2+, Cu2+대기유억제작용.측정해매N단20개안기산적서렬시ValIleGluGluAspGluCysAsnIleAsnGluHisArgPheLeu, 여기타적사독류응혈매유고도동원성.