CAJ | 학술논문

目的了解ELISA法筛查血液乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的漏检率,探讨荧光定量聚合酶链反应(Flurescence quantitative PCR,FQ-PCR)技术用于混合血浆标本病毒核酸检测的可行性. 方法应用FQ-PCR技术对常规ELISA初复检正常献血者(包括无偿献血者和个体献血者)的微量血浆汇集池标本(10人份×20 μ1)进行HBV DNA检测,再对阳性汇集池中的标本进行单份检测.用双蒸水和HBV DNA阴性汇集池中的血浆标本分别对HBV DNA 标准品(浓度为103拷贝/ml)作10～50倍稀释后行FQ-PCR测定,观察不同的血浆标本混合后是否存在Taq酶抑制物的叠加作用及对PCR结果有无影响.对浓度为10拷贝/ml～104拷贝/ml的HBV DNA标准品分别进行FQ-PCR检测,确定试剂盒的敏感度. 结果 1 200份无偿献血者标本中有11例HBV DNA阳性(0.92%);470份个体献血者标本中有10例HBV DNA阳性(2.13%).双蒸水与混合血浆稀释的HBV DNA 标准品的FQ-PCR检测结果(定性)完全一致.试剂盒的检出下限为102拷贝/ml. 结论 ELISA 法筛查血液存在较高的HBV漏检率,FQ-PCR用于混合血浆标本的病毒核酸检测是可行的.
목적료해ELISA법사사혈액을형간염병독(hepatitis B virus,HBV)적루검솔,탐토형광정량취합매련반응(Flurescence quantitative PCR,FQ-PCR)기술용우혼합혈장표본병독핵산검측적가행성. 방법응용FQ-PCR기술대상규ELISA초복검정상헌혈자(포괄무상헌혈자화개체헌혈자)적미량혈장회집지표본(10인빈×20 μ1)진행HBV DNA검측,재대양성회집지중적표본진행단빈검측.용쌍증수화HBV DNA음성회집지중적혈장표본분별대HBV DNA 표준품(농도위103고패/ml)작10～50배희석후행FQ-PCR측정,관찰불동적혈장표본혼합후시부존재Taq매억제물적첩가작용급대PCR결과유무영향.대농도위10고패/ml～104고패/ml적HBV DNA표준품분별진행FQ-PCR검측,학정시제합적민감도. 결과 1 200빈무상헌혈자표본중유11례HBV DNA양성(0.92%);470빈개체헌혈자표본중유10례HBV DNA양성(2.13%).쌍증수여혼합혈장희석적HBV DNA 표준품적FQ-PCR검측결과(정성)완전일치.시제합적검출하한위102고패/ml. 결론 ELISA 법사사혈액존재교고적HBV루검솔,FQ-PCR용우혼합혈장표본적병독핵산검측시가행적.