解放军医学杂志
解放軍醫學雜誌
해방군의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2004年
10期
882-884
,共3页
龚小卫%彭毅%刘靖华%邓鹏%刘志锋%秦清和%姜勇
龔小衛%彭毅%劉靖華%鄧鵬%劉誌鋒%秦清和%薑勇
공소위%팽의%류정화%산붕%류지봉%진청화%강용
基因,ARPC2%RNA干扰%基因表达
基因,ARPC2%RNA榦擾%基因錶達
기인,ARPC2%RNA간우%기인표체
目的构建pSUPER-ARPC2表达载体,并在真核细胞中进行表达,验证ARPC2基因表达是否受到抑制.方法设计特异性针对ARPC2基因的寡核苷酸序列,退火后利用常规酶切、连接方法将其重组至pSUPER.basic载体中.对阳性克隆进行酶切和测序鉴定后,转染HEK 293细胞,利用RT-PCR和Western blot检测ARPC2基因的表达情况.结果构建的pSUPER-ARPC2载体导入HEK 293细胞时,ARPC2基因的表达受到抑制,蛋白合成减少.结论成功构建了ARPC2的RNAi表达载体,并证实其能对ARPC2基因的表达产生抑制作用,为进一步研究ARPC2的生理功能提供了重要的实验材料.
目的構建pSUPER-ARPC2錶達載體,併在真覈細胞中進行錶達,驗證ARPC2基因錶達是否受到抑製.方法設計特異性針對ARPC2基因的寡覈苷痠序列,退火後利用常規酶切、連接方法將其重組至pSUPER.basic載體中.對暘性剋隆進行酶切和測序鑒定後,轉染HEK 293細胞,利用RT-PCR和Western blot檢測ARPC2基因的錶達情況.結果構建的pSUPER-ARPC2載體導入HEK 293細胞時,ARPC2基因的錶達受到抑製,蛋白閤成減少.結論成功構建瞭ARPC2的RNAi錶達載體,併證實其能對ARPC2基因的錶達產生抑製作用,為進一步研究ARPC2的生理功能提供瞭重要的實驗材料.
목적구건pSUPER-ARPC2표체재체,병재진핵세포중진행표체,험증ARPC2기인표체시부수도억제.방법설계특이성침대ARPC2기인적과핵감산서렬,퇴화후이용상규매절、련접방법장기중조지pSUPER.basic재체중.대양성극륭진행매절화측서감정후,전염HEK 293세포,이용RT-PCR화Western blot검측ARPC2기인적표체정황.결과구건적pSUPER-ARPC2재체도입HEK 293세포시,ARPC2기인적표체수도억제,단백합성감소.결론성공구건료ARPC2적RNAi표체재체,병증실기능대ARPC2기인적표체산생억제작용,위진일보연구ARPC2적생리공능제공료중요적실험재료.
