中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2005年
2期
113-116
,共4页
李建娜%向开军%周荣%丁勇强%白培胜%张裕平%朱冰%曾其毅
李建娜%嚮開軍%週榮%丁勇彊%白培勝%張裕平%硃冰%曾其毅
리건나%향개군%주영%정용강%백배성%장유평%주빙%증기의
SARS冠状病毒%M蛋白%DNA疫苗
SARS冠狀病毒%M蛋白%DNA疫苗
SARS관상병독%M단백%DNA역묘
为探讨SARS-CoV的M蛋白的免疫学特性以及M蛋白作为SARS-CoV病毒疫苗组分的可行性和必要性.分别用pET-15b和pET-22b在大肠杆菌中表达SARS-CoV的M蛋白,亲和层析纯化后作为抗原应用.同时,将M蛋白的编码基因克隆进分泌型真核表达载体pSecTagB中得到重组质粒pSecM作为DNA疫苗,免疫BALB/c小白鼠、制备SARS-CoV M蛋白的抗血清.并用纯化后的M蛋白建立的SARS-CoV M抗体ELISA检测技术研究所构建的M-DNA疫苗的免疫效果.结果表明:两种重组M蛋白在大肠杆菌中均以可溶性形式得到高效表达,经与华大产的用灭活SARS全病毒制备的SARS-CoV抗体ELISA检测试剂盒比较实验,证明该原核表达的重组M蛋白能与SARS确诊病人血清以及M-DNA免疫鼠血清发生特异性抗原抗体反应.这两种重组M蛋白有可能作为抗原组分用于临床SARS-CoV检测中;所构建的SARS-CoV的M基因核酸疫苗能在小鼠体内产生特异性抗体,提示M蛋白在SARS-CoV疫苗尤其是组分疫苗的研制中应加以考虑,为DNA疫苗的开发提供了依据.
為探討SARS-CoV的M蛋白的免疫學特性以及M蛋白作為SARS-CoV病毒疫苗組分的可行性和必要性.分彆用pET-15b和pET-22b在大腸桿菌中錶達SARS-CoV的M蛋白,親和層析純化後作為抗原應用.同時,將M蛋白的編碼基因剋隆進分泌型真覈錶達載體pSecTagB中得到重組質粒pSecM作為DNA疫苗,免疫BALB/c小白鼠、製備SARS-CoV M蛋白的抗血清.併用純化後的M蛋白建立的SARS-CoV M抗體ELISA檢測技術研究所構建的M-DNA疫苗的免疫效果.結果錶明:兩種重組M蛋白在大腸桿菌中均以可溶性形式得到高效錶達,經與華大產的用滅活SARS全病毒製備的SARS-CoV抗體ELISA檢測試劑盒比較實驗,證明該原覈錶達的重組M蛋白能與SARS確診病人血清以及M-DNA免疫鼠血清髮生特異性抗原抗體反應.這兩種重組M蛋白有可能作為抗原組分用于臨床SARS-CoV檢測中;所構建的SARS-CoV的M基因覈痠疫苗能在小鼠體內產生特異性抗體,提示M蛋白在SARS-CoV疫苗尤其是組分疫苗的研製中應加以攷慮,為DNA疫苗的開髮提供瞭依據.
위탐토SARS-CoV적M단백적면역학특성이급M단백작위SARS-CoV병독역묘조분적가행성화필요성.분별용pET-15b화pET-22b재대장간균중표체SARS-CoV적M단백,친화층석순화후작위항원응용.동시,장M단백적편마기인극륭진분비형진핵표체재체pSecTagB중득도중조질립pSecM작위DNA역묘,면역BALB/c소백서、제비SARS-CoV M단백적항혈청.병용순화후적M단백건립적SARS-CoV M항체ELISA검측기술연구소구건적M-DNA역묘적면역효과.결과표명:량충중조M단백재대장간균중균이가용성형식득도고효표체,경여화대산적용멸활SARS전병독제비적SARS-CoV항체ELISA검측시제합비교실험,증명해원핵표체적중조M단백능여SARS학진병인혈청이급M-DNA면역서혈청발생특이성항원항체반응.저량충중조M단백유가능작위항원조분용우림상SARS-CoV검측중;소구건적SARS-CoV적M기인핵산역묘능재소서체내산생특이성항체,제시M단백재SARS-CoV역묘우기시조분역묘적연제중응가이고필,위DNA역묘적개발제공료의거.
