微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2008年
2期
234-238
,共5页
褚新星%彭军%翁立雪%朱瑞良%牛钟相
褚新星%彭軍%翁立雪%硃瑞良%牛鐘相
저신성%팽군%옹립설%주서량%우종상
鸡C3d%pUC-P29.n%HI%F基因疫苗
鷄C3d%pUC-P29.n%HI%F基因疫苗
계C3d%pUC-P29.n%HI%F기인역묘
C3d是补体C3的裂解产物之一,与抗原相连时可以明显提高抗原分子的免疫原性.CR2/CD21在其功能发挥过程中起到重要作用,P29为编码C3d与CR2结合区域的基因.从健康AA肉鸡肝脏中RT-PCR克隆C3d cDNA,设计引物克隆P29至pUC19载体,利用同裂酶BamH Ⅰ和Bgl Ⅱ构建pUC-P29.n.酶切获得P29.n,将其克隆至真核表达载体pCDNA3.1(+).最后RT-PCR扩增新城疫F基因,定向克隆至真核表达载体pCDNA-P29.n中P29.n的上游,构建完成新城疫F基因疫苗.3周龄SPF鸡进行基因免疫,结果pCDNA-F-P29.4、pCDNA-F-P29.6较pCDNA-F都能够提高HI抗体水平及保护力,虽然HI抗体水平不及灭活苗,但是能够抵抗致死量病毒的攻击,并且pCDNA-F-P29.6效果更好.目前发表的关于C3d的佐剂作用的文章多是关于鼠C3d,相应的抗原不能够自然感染鼠类,关于鸡C3d的报道较少.研究结果为进一步开发和利用鸡C3d奠定了基础.
C3d是補體C3的裂解產物之一,與抗原相連時可以明顯提高抗原分子的免疫原性.CR2/CD21在其功能髮揮過程中起到重要作用,P29為編碼C3d與CR2結閤區域的基因.從健康AA肉鷄肝髒中RT-PCR剋隆C3d cDNA,設計引物剋隆P29至pUC19載體,利用同裂酶BamH Ⅰ和Bgl Ⅱ構建pUC-P29.n.酶切穫得P29.n,將其剋隆至真覈錶達載體pCDNA3.1(+).最後RT-PCR擴增新城疫F基因,定嚮剋隆至真覈錶達載體pCDNA-P29.n中P29.n的上遊,構建完成新城疫F基因疫苗.3週齡SPF鷄進行基因免疫,結果pCDNA-F-P29.4、pCDNA-F-P29.6較pCDNA-F都能夠提高HI抗體水平及保護力,雖然HI抗體水平不及滅活苗,但是能夠牴抗緻死量病毒的攻擊,併且pCDNA-F-P29.6效果更好.目前髮錶的關于C3d的佐劑作用的文章多是關于鼠C3d,相應的抗原不能夠自然感染鼠類,關于鷄C3d的報道較少.研究結果為進一步開髮和利用鷄C3d奠定瞭基礎.
C3d시보체C3적렬해산물지일,여항원상련시가이명현제고항원분자적면역원성.CR2/CD21재기공능발휘과정중기도중요작용,P29위편마C3d여CR2결합구역적기인.종건강AA육계간장중RT-PCR극륭C3d cDNA,설계인물극륭P29지pUC19재체,이용동렬매BamH Ⅰ화Bgl Ⅱ구건pUC-P29.n.매절획득P29.n,장기극륭지진핵표체재체pCDNA3.1(+).최후RT-PCR확증신성역F기인,정향극륭지진핵표체재체pCDNA-P29.n중P29.n적상유,구건완성신성역F기인역묘.3주령SPF계진행기인면역,결과pCDNA-F-P29.4、pCDNA-F-P29.6교pCDNA-F도능구제고HI항체수평급보호력,수연HI항체수평불급멸활묘,단시능구저항치사량병독적공격,병차pCDNA-F-P29.6효과경호.목전발표적관우C3d적좌제작용적문장다시관우서C3d,상응적항원불능구자연감염서류,관우계C3d적보도교소.연구결과위진일보개발화이용계C3d전정료기출.
