南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2009年
5期
848-851
,共4页
欧志兵%黄庆勇%孙科%魏思东%龚建平%涂兵
歐誌兵%黃慶勇%孫科%魏思東%龔建平%塗兵
구지병%황경용%손과%위사동%공건평%도병
Kupffer细胞%肝X受体α%干扰素调节因子3%糖皮质激素受体反应蛋白1%干扰素β%肿瘤坏死因子-α%白细胞介素-1β
Kupffer細胞%肝X受體α%榦擾素調節因子3%糖皮質激素受體反應蛋白1%榦擾素β%腫瘤壞死因子-α%白細胞介素-1β
Kupffer세포%간X수체α%간우소조절인자3%당피질격소수체반응단백1%간우소β%종류배사인자-α%백세포개소-1β
目的 通过观察肝X受体α(LXRα)激动剂对脂多糖(LPS)刺激后Kupffer细胞干扰素调节因子3(IRF3)、糖皮质激素受体反应蛋白1(GRIP1)、LXRα表达的影响,探讨LXR α负性调控炎症反应的相关机制.方法 采用胶原酶原位灌注法分离和培养雄性KM小鼠肝脏中的Kupffer细胞,所得细胞在含20%小牛血清和1%青霉素/链霉素的1640培养基中培养.将分离的Kupffer细胞随机分为4组:空白对照组、TLR4配体激活剂LPS(1 μg/ml)组、LXRα配体激活剂T0901317(5 μg/ml)组、LPS和T0901317共同处理组.收集培养细胞,采用Western boltting法检测Kupffer细胞的LXRα、GRIP1及IRF3蛋白表达水平.ELISA检测Kupffer细胞培养上清液中干扰素(IFN)β、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β含量.结果 LXR α蛋白质表达水平在T0901317处理组最高,LPS处理组最低.联合处理组中,LXRα表达明显低于T0901317处理组(P<0.05),但又显著高于其他两组(P<0.05).IRF3及GRIP1蛋白表达量在LPS组最高,联合处理组表达明显降低,两组间均有显著差异(P<0.05);在LPS组及联合处理组中,IRF3及GRIP1蛋白表达量均高于对照组及T0901317处理组(P<0.05).IFNβ在LPS处理组的含量较对照组和T0901317处理组明显增高(P<0.05);联合处理组IFNβ含量比LPS处理组明显降低(P<0.05);IFNβ表达T0901317处理组表达最低.TNF-α在LPS处理组的含量较其他3组明显增高(P<0.05);对照组、T0901317处理组和联合处理组水平较低,且他们3组之间无明显差别(P>0.05).IL-1β的表达趋势与TNF-α相同.结论 在应用LPS处理之前预防性应用LXRα激动剂,能明显抑制Kupffer细胞的IRF3及GRIP1表达.通过抑制IRF3、GRIP1的表达而发挥抗炎效应,从而抑制LPS所诱导的Kupffer细胞活化.
目的 通過觀察肝X受體α(LXRα)激動劑對脂多糖(LPS)刺激後Kupffer細胞榦擾素調節因子3(IRF3)、糖皮質激素受體反應蛋白1(GRIP1)、LXRα錶達的影響,探討LXR α負性調控炎癥反應的相關機製.方法 採用膠原酶原位灌註法分離和培養雄性KM小鼠肝髒中的Kupffer細胞,所得細胞在含20%小牛血清和1%青黴素/鏈黴素的1640培養基中培養.將分離的Kupffer細胞隨機分為4組:空白對照組、TLR4配體激活劑LPS(1 μg/ml)組、LXRα配體激活劑T0901317(5 μg/ml)組、LPS和T0901317共同處理組.收集培養細胞,採用Western boltting法檢測Kupffer細胞的LXRα、GRIP1及IRF3蛋白錶達水平.ELISA檢測Kupffer細胞培養上清液中榦擾素(IFN)β、腫瘤壞死因子(TNF)-α和白細胞介素(IL)-1β含量.結果 LXR α蛋白質錶達水平在T0901317處理組最高,LPS處理組最低.聯閤處理組中,LXRα錶達明顯低于T0901317處理組(P<0.05),但又顯著高于其他兩組(P<0.05).IRF3及GRIP1蛋白錶達量在LPS組最高,聯閤處理組錶達明顯降低,兩組間均有顯著差異(P<0.05);在LPS組及聯閤處理組中,IRF3及GRIP1蛋白錶達量均高于對照組及T0901317處理組(P<0.05).IFNβ在LPS處理組的含量較對照組和T0901317處理組明顯增高(P<0.05);聯閤處理組IFNβ含量比LPS處理組明顯降低(P<0.05);IFNβ錶達T0901317處理組錶達最低.TNF-α在LPS處理組的含量較其他3組明顯增高(P<0.05);對照組、T0901317處理組和聯閤處理組水平較低,且他們3組之間無明顯差彆(P>0.05).IL-1β的錶達趨勢與TNF-α相同.結論 在應用LPS處理之前預防性應用LXRα激動劑,能明顯抑製Kupffer細胞的IRF3及GRIP1錶達.通過抑製IRF3、GRIP1的錶達而髮揮抗炎效應,從而抑製LPS所誘導的Kupffer細胞活化.
목적 통과관찰간X수체α(LXRα)격동제대지다당(LPS)자격후Kupffer세포간우소조절인자3(IRF3)、당피질격소수체반응단백1(GRIP1)、LXRα표체적영향,탐토LXR α부성조공염증반응적상관궤제.방법 채용효원매원위관주법분리화배양웅성KM소서간장중적Kupffer세포,소득세포재함20%소우혈청화1%청매소/련매소적1640배양기중배양.장분리적Kupffer세포수궤분위4조:공백대조조、TLR4배체격활제LPS(1 μg/ml)조、LXRα배체격활제T0901317(5 μg/ml)조、LPS화T0901317공동처리조.수집배양세포,채용Western boltting법검측Kupffer세포적LXRα、GRIP1급IRF3단백표체수평.ELISA검측Kupffer세포배양상청액중간우소(IFN)β、종류배사인자(TNF)-α화백세포개소(IL)-1β함량.결과 LXR α단백질표체수평재T0901317처리조최고,LPS처리조최저.연합처리조중,LXRα표체명현저우T0901317처리조(P<0.05),단우현저고우기타량조(P<0.05).IRF3급GRIP1단백표체량재LPS조최고,연합처리조표체명현강저,량조간균유현저차이(P<0.05);재LPS조급연합처리조중,IRF3급GRIP1단백표체량균고우대조조급T0901317처리조(P<0.05).IFNβ재LPS처리조적함량교대조조화T0901317처리조명현증고(P<0.05);연합처리조IFNβ함량비LPS처리조명현강저(P<0.05);IFNβ표체T0901317처리조표체최저.TNF-α재LPS처리조적함량교기타3조명현증고(P<0.05);대조조、T0901317처리조화연합처리조수평교저,차타문3조지간무명현차별(P>0.05).IL-1β적표체추세여TNF-α상동.결론 재응용LPS처리지전예방성응용LXRα격동제,능명현억제Kupffer세포적IRF3급GRIP1표체.통과억제IRF3、GRIP1적표체이발휘항염효응,종이억제LPS소유도적Kupffer세포활화.
