微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2010年
3期
69-73
,共5页
史俊岩%王美莲%刘兵%罗恩杰
史俊巖%王美蓮%劉兵%囉恩傑
사준암%왕미련%류병%라은걸
麻疹病毒%RNA干扰%shRNA%Rab9 GTPase
痳疹病毒%RNA榦擾%shRNA%Rab9 GTPase
마진병독%RNA간우%shRNA%Rab9 GTPase
为了研究短发夹RNA(shRNA)介导的RNA干扰对麻疹病毒体外复制的抑制作用,构建靶向与麻疹病毒复制密切相关的宿主细胞基因Rab9 GTPase基因特异性shRNA表达载体,分别转染Vero-E6和B95a细胞后感染麻疹病毒Edmonston株和野生株.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹技术(Western-blot)检测转染细胞内Rab9 GTPase 基因表达水平;标准蚀斑试验测定麻疹病毒滴度.结果显示转染细胞内Rab9 GTPase mRNA和蛋白质的表达水平同对照组相比明显降低,标准蚀斑试验显示麻疹病毒的复制受到显著抑制,抑制率达到90%以上.结果表明载体介导的shRNAs能通过特异性下调Rab9 GTPase基因表达抑制麻疹病毒体外复制,Rab9 GTPase可能成为治疗麻疹病毒感染的RNA干扰靶.
為瞭研究短髮夾RNA(shRNA)介導的RNA榦擾對痳疹病毒體外複製的抑製作用,構建靶嚮與痳疹病毒複製密切相關的宿主細胞基因Rab9 GTPase基因特異性shRNA錶達載體,分彆轉染Vero-E6和B95a細胞後感染痳疹病毒Edmonston株和野生株.逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和免疫印跡技術(Western-blot)檢測轉染細胞內Rab9 GTPase 基因錶達水平;標準蝕斑試驗測定痳疹病毒滴度.結果顯示轉染細胞內Rab9 GTPase mRNA和蛋白質的錶達水平同對照組相比明顯降低,標準蝕斑試驗顯示痳疹病毒的複製受到顯著抑製,抑製率達到90%以上.結果錶明載體介導的shRNAs能通過特異性下調Rab9 GTPase基因錶達抑製痳疹病毒體外複製,Rab9 GTPase可能成為治療痳疹病毒感染的RNA榦擾靶.
위료연구단발협RNA(shRNA)개도적RNA간우대마진병독체외복제적억제작용,구건파향여마진병독복제밀절상관적숙주세포기인Rab9 GTPase기인특이성shRNA표체재체,분별전염Vero-E6화B95a세포후감염마진병독Edmonston주화야생주.역전록취합매련반응(RT-PCR)화면역인적기술(Western-blot)검측전염세포내Rab9 GTPase 기인표체수평;표준식반시험측정마진병독적도.결과현시전염세포내Rab9 GTPase mRNA화단백질적표체수평동대조조상비명현강저,표준식반시험현시마진병독적복제수도현저억제,억제솔체도90%이상.결과표명재체개도적shRNAs능통과특이성하조Rab9 GTPase기인표체억제마진병독체외복제,Rab9 GTPase가능성위치료마진병독감염적RNA간우파.