畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2011年
6期
759-764
,共6页
SON-PCR%猪%SelS基因%启动子%序列分析
SON-PCR%豬%SelS基因%啟動子%序列分析
SON-PCR%저%SelS기인%계동자%서렬분석
本研究旨在克隆和分析猪硒蛋白S基因(Selenoprotein S,SelS)启动子序列,并初步探讨潜在转录因子结合位点对其表达的影响.通过SON-PCR技术克隆猪SelS基因启动子序列,利用PromoterScan、Promoter 2.0等在线工具预测其启动子特征,利用细菌脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)刺激PK15细胞,研究NF-kappaB转录因子对猪SelS基因启动子活性的影响.试验获得了猪SelS基因约3kd的启动子序列,部分序列比对发现猪、人、牛和小鼠物种间相似性仅7%～51%.预测猪SelS基因转录起始位点在-398 bp,猪和人SelS基因启动子存在系列保守的转录因子结合位点,包括NF-kappaB、CCAAT box、SP1、USF等,但均未发现典型的TATA box.细胞试验表明,NF-kappaB转录因子可以上调猪SelS基因的表达.结果提示,物种间SelS基因启动子相似性较低,但猪和人SelS基因的转录因子非常保守,LPS诱导试验提示,猪SelS基因表达可能受NF-kappaB转录因子的调控.
本研究旨在剋隆和分析豬硒蛋白S基因(Selenoprotein S,SelS)啟動子序列,併初步探討潛在轉錄因子結閤位點對其錶達的影響.通過SON-PCR技術剋隆豬SelS基因啟動子序列,利用PromoterScan、Promoter 2.0等在線工具預測其啟動子特徵,利用細菌脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)刺激PK15細胞,研究NF-kappaB轉錄因子對豬SelS基因啟動子活性的影響.試驗穫得瞭豬SelS基因約3kd的啟動子序列,部分序列比對髮現豬、人、牛和小鼠物種間相似性僅7%～51%.預測豬SelS基因轉錄起始位點在-398 bp,豬和人SelS基因啟動子存在繫列保守的轉錄因子結閤位點,包括NF-kappaB、CCAAT box、SP1、USF等,但均未髮現典型的TATA box.細胞試驗錶明,NF-kappaB轉錄因子可以上調豬SelS基因的錶達.結果提示,物種間SelS基因啟動子相似性較低,但豬和人SelS基因的轉錄因子非常保守,LPS誘導試驗提示,豬SelS基因錶達可能受NF-kappaB轉錄因子的調控.
본연구지재극륭화분석저서단백S기인(Selenoprotein S,SelS)계동자서렬,병초보탐토잠재전록인자결합위점대기표체적영향.통과SON-PCR기술극륭저SelS기인계동자서렬,이용PromoterScan、Promoter 2.0등재선공구예측기계동자특정,이용세균지다당(Lipopolysaccharides,LPS)자격PK15세포,연구NF-kappaB전록인자대저SelS기인계동자활성적영향.시험획득료저SelS기인약3kd적계동자서렬,부분서렬비대발현저、인、우화소서물충간상사성부7%～51%.예측저SelS기인전록기시위점재-398 bp,저화인SelS기인계동자존재계렬보수적전록인자결합위점,포괄NF-kappaB、CCAAT box、SP1、USF등,단균미발현전형적TATA box.세포시험표명,NF-kappaB전록인자가이상조저SelS기인적표체.결과제시,물충간SelS기인계동자상사성교저,단저화인SelS기인적전록인자비상보수,LPS유도시험제시,저SelS기인표체가능수NF-kappaB전록인자적조공.
