食品安全质量检测学报
食品安全質量檢測學報
식품안전질량검측학보
FOOD SAFETY AND QUALITY DETECTION TECHNOLOGY
2012年
3期
177-181
,共5页
熊槐%吴凡%冯雪梅%黄昱阳%杜正平%周毅%田文武%曹以诚
熊槐%吳凡%馮雪梅%黃昱暘%杜正平%週毅%田文武%曹以誠
웅괴%오범%풍설매%황욱양%두정평%주의%전문무%조이성
LAMP%转基因作物%Bst DNA聚合酶%CaMV35S启动子%NOS终止子
LAMP%轉基因作物%Bst DNA聚閤酶%CaMV35S啟動子%NOS終止子
LAMP%전기인작물%Bst DNA취합매%CaMV35S계동자%NOS종지자
目的 建立简易的可视化环介导等温扩增(LAMP)检测转基因作物的方法.方法 通过一对特异的能识别一段正义链和一段反义链的内引物和一对链置换引物,在Bst DNA聚合酶作用下,以等温条件实现对外源转基因成分的扩增,反应液和高浓度的显色液SYBR GREEN I同时置于特殊设计的反应管中,反应后可实现闭管可视化检测.结果 对转基因作物中常见的外源基因元件胭脂碱合成酶终止子(T-NOS)和烟草花叶病毒35S启动子(P-CaMV35S)进行了LAMP检测.T-NOS LAMP对大米品系BT63,玉米品系BT11,MON810,大豆品系GTS40-3-2的检测结果呈阳性,P-CaMV35S LAMP对大米品系BT63,玉米品系BT11,MON810,MON863,大豆品系GTS40-3-2的检测结果呈阳性,二者对非转基因大米,玉米,大豆的检测结果均呈阴性.上述结果表明,本文中建立的T-NOS和P-CaMV35S LAMP检测方法特异性高.另外,通过对大豆品系GTS40-3-2模拟样品的检测,证明T-NOS LAMP能检出转基因成分含量为0.5％的样品,P-CaMV35S LAMP能检出转基因成分含量为0.1％的样品,检测灵敏度较高.结论 改良LAMP法灵敏度高,特异性好,能用于快速初筛转基因作物.
目的 建立簡易的可視化環介導等溫擴增(LAMP)檢測轉基因作物的方法.方法 通過一對特異的能識彆一段正義鏈和一段反義鏈的內引物和一對鏈置換引物,在Bst DNA聚閤酶作用下,以等溫條件實現對外源轉基因成分的擴增,反應液和高濃度的顯色液SYBR GREEN I同時置于特殊設計的反應管中,反應後可實現閉管可視化檢測.結果 對轉基因作物中常見的外源基因元件胭脂堿閤成酶終止子(T-NOS)和煙草花葉病毒35S啟動子(P-CaMV35S)進行瞭LAMP檢測.T-NOS LAMP對大米品繫BT63,玉米品繫BT11,MON810,大豆品繫GTS40-3-2的檢測結果呈暘性,P-CaMV35S LAMP對大米品繫BT63,玉米品繫BT11,MON810,MON863,大豆品繫GTS40-3-2的檢測結果呈暘性,二者對非轉基因大米,玉米,大豆的檢測結果均呈陰性.上述結果錶明,本文中建立的T-NOS和P-CaMV35S LAMP檢測方法特異性高.另外,通過對大豆品繫GTS40-3-2模擬樣品的檢測,證明T-NOS LAMP能檢齣轉基因成分含量為0.5％的樣品,P-CaMV35S LAMP能檢齣轉基因成分含量為0.1％的樣品,檢測靈敏度較高.結論 改良LAMP法靈敏度高,特異性好,能用于快速初篩轉基因作物.
목적 건립간역적가시화배개도등온확증(LAMP)검측전기인작물적방법.방법 통과일대특이적능식별일단정의련화일단반의련적내인물화일대련치환인물,재Bst DNA취합매작용하,이등온조건실현대외원전기인성분적확증,반응액화고농도적현색액SYBR GREEN I동시치우특수설계적반응관중,반응후가실현폐관가시화검측.결과 대전기인작물중상견적외원기인원건연지감합성매종지자(T-NOS)화연초화협병독35S계동자(P-CaMV35S)진행료LAMP검측.T-NOS LAMP대대미품계BT63,옥미품계BT11,MON810,대두품계GTS40-3-2적검측결과정양성,P-CaMV35S LAMP대대미품계BT63,옥미품계BT11,MON810,MON863,대두품계GTS40-3-2적검측결과정양성,이자대비전기인대미,옥미,대두적검측결과균정음성.상술결과표명,본문중건립적T-NOS화P-CaMV35S LAMP검측방법특이성고.령외,통과대대두품계GTS40-3-2모의양품적검측,증명T-NOS LAMP능검출전기인성분함량위0.5％적양품,P-CaMV35S LAMP능검출전기인성분함량위0.1％적양품,검측령민도교고.결론 개량LAMP법령민도고,특이성호,능용우쾌속초사전기인작물.
