中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2002年
11期
1400-1403
,共4页
袁栎%付静宜%刘建彬%于立身%王烨%曹颖%罗超权%刘丽
袁櫟%付靜宜%劉建彬%于立身%王燁%曹穎%囉超權%劉麗
원력%부정의%류건빈%우립신%왕엽%조영%라초권%류려
受体,肾上腺素能α%表达调控%DNA结合蛋白质类%晕动病
受體,腎上腺素能α%錶達調控%DNA結閤蛋白質類%暈動病
수체,신상선소능α%표체조공%DNA결합단백질류%훈동병
目的:研究人肾上腺素α2A受体基因-1296位G/C多态性对DNA与蛋白质结合的影响.方法:以重组质粒为模板,扩增-1296位为G或C的390 bp片段(-1414--1025)bp,分别与细胞核蛋白质结合,经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,与地高辛(Dig)标记的同源DNA片段杂交.另将Dig-dUTP标记的同一片段与经SDS-PAGE转印至膜上的细胞核蛋白质进行DNA-蛋白质结合反应,以抗Dig抗体检测结合反应信号.结果:EMSA结果显示,-1296位为C的片段可与细胞核蛋白质结合,X光片上显示一条特异性结合带;为G时则无;人肾上腺素α2A受体基因(-1414--1025) bp 390 bp DNA片段与细胞核提取物杂交结果显示,在约15 kU位置可见一蛋白质条带.结论:肾上腺素α2A受体基因-1414--102 5bp之间可能存在一转录因子结合位点,-1296位为C时,能与一特异性核蛋白结合,此蛋白质的相对分子量约为15 kU.
目的:研究人腎上腺素α2A受體基因-1296位G/C多態性對DNA與蛋白質結閤的影響.方法:以重組質粒為模闆,擴增-1296位為G或C的390 bp片段(-1414--1025)bp,分彆與細胞覈蛋白質結閤,經非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳,與地高辛(Dig)標記的同源DNA片段雜交.另將Dig-dUTP標記的同一片段與經SDS-PAGE轉印至膜上的細胞覈蛋白質進行DNA-蛋白質結閤反應,以抗Dig抗體檢測結閤反應信號.結果:EMSA結果顯示,-1296位為C的片段可與細胞覈蛋白質結閤,X光片上顯示一條特異性結閤帶;為G時則無;人腎上腺素α2A受體基因(-1414--1025) bp 390 bp DNA片段與細胞覈提取物雜交結果顯示,在約15 kU位置可見一蛋白質條帶.結論:腎上腺素α2A受體基因-1414--102 5bp之間可能存在一轉錄因子結閤位點,-1296位為C時,能與一特異性覈蛋白結閤,此蛋白質的相對分子量約為15 kU.
목적:연구인신상선소α2A수체기인-1296위G/C다태성대DNA여단백질결합적영향.방법:이중조질립위모판,확증-1296위위G혹C적390 bp편단(-1414--1025)bp,분별여세포핵단백질결합,경비변성취병희선알응효전영,여지고신(Dig)표기적동원DNA편단잡교.령장Dig-dUTP표기적동일편단여경SDS-PAGE전인지막상적세포핵단백질진행DNA-단백질결합반응,이항Dig항체검측결합반응신호.결과:EMSA결과현시,-1296위위C적편단가여세포핵단백질결합,X광편상현시일조특이성결합대;위G시칙무;인신상선소α2A수체기인(-1414--1025) bp 390 bp DNA편단여세포핵제취물잡교결과현시,재약15 kU위치가견일단백질조대.결론:신상선소α2A수체기인-1414--102 5bp지간가능존재일전록인자결합위점,-1296위위C시,능여일특이성핵단백결합,차단백질적상대분자량약위15 kU.
