四川师范大学学报（自然科学版）
四川師範大學學報（自然科學版）
사천사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2006年
6期
739-742
,共4页
苟帮超%叶盛%李维%杨玉
茍幫超%葉盛%李維%楊玉
구방초%협성%리유%양옥
产气肠杆菌%α-乙酰乳酸脱羧酶%基因克隆%表达
產氣腸桿菌%α-乙酰乳痠脫羧酶%基因剋隆%錶達
산기장간균%α-을선유산탈최매%기인극륭%표체
根据已知的α-乙酰乳酸脱羧酶(α-acetolactatedecarboxylase,ALDC,EC.4.1.1.5)基因序列,利用PCR方法从产气大肠杆菌(Enterobacter aerogenes)中克隆到0.8kb的DNA片段,经DNA序列分析表明该DNA片段为ALDC基因.将该片段插入到原核表达载体pBV220中,获得表达质粒pBVEDAD,转化大肠杆菌DH5α(Escherichia coli),经热诱导后,通过SDS-PAGE分析和酶活测定,结果表明ALDC获得了高效表达.重组细胞表达的ALDC酶活是出发菌产气肠杆菌(E.aerogenes)的1 100倍.DH5α(pBVEDAD)在无选择压力下37℃连续培养60代,在42℃下热诱导5 h未见质粒丢失.
根據已知的α-乙酰乳痠脫羧酶(α-acetolactatedecarboxylase,ALDC,EC.4.1.1.5)基因序列,利用PCR方法從產氣大腸桿菌(Enterobacter aerogenes)中剋隆到0.8kb的DNA片段,經DNA序列分析錶明該DNA片段為ALDC基因.將該片段插入到原覈錶達載體pBV220中,穫得錶達質粒pBVEDAD,轉化大腸桿菌DH5α(Escherichia coli),經熱誘導後,通過SDS-PAGE分析和酶活測定,結果錶明ALDC穫得瞭高效錶達.重組細胞錶達的ALDC酶活是齣髮菌產氣腸桿菌(E.aerogenes)的1 100倍.DH5α(pBVEDAD)在無選擇壓力下37℃連續培養60代,在42℃下熱誘導5 h未見質粒丟失.
근거이지적α-을선유산탈최매(α-acetolactatedecarboxylase,ALDC,EC.4.1.1.5)기인서렬,이용PCR방법종산기대장간균(Enterobacter aerogenes)중극륭도0.8kb적DNA편단,경DNA서렬분석표명해DNA편단위ALDC기인.장해편단삽입도원핵표체재체pBV220중,획득표체질립pBVEDAD,전화대장간균DH5α(Escherichia coli),경열유도후,통과SDS-PAGE분석화매활측정,결과표명ALDC획득료고효표체.중조세포표체적ALDC매활시출발균산기장간균(E.aerogenes)적1 100배.DH5α(pBVEDAD)재무선택압력하37℃련속배양60대,재42℃하열유도5 h미견질립주실.
