CAJ | 학술논문

目的探索烙铁头蛇毒TM-N49对人肥大细胞释放组胺的诱导作用及其机制.方法用SP-Sephadex C-25,肝素凝胶,Superdex75分子筛及HPLC纯化TM-N49.将手术切除的人肺、大肠和扁桃体组织在37℃条件下用Ⅰ型胶原酶和Ⅰ型透明质酸酶消化,经悬浮后的细胞均匀地加入含TM-N49、刺激剂或缓冲液的试管中,进行激发实验并用荧光显色法测量上清液的组胺水平.结果纯化后的TM-N49在SDS-PAGE上呈一条带.TM-N49能诱导人肺、大肠和扁桃体肥大细胞发生剂量依赖性组胺释放.浓度为0.3μg/ml时,TM-N49就能诱导大肠肥大细胞显著性的组胺释放,但对于人肺肥大细胞来说,诱导它释放相同量组胺所需最低TM-N49浓度为3μg/ml,而对于扁桃体肥大细胞,TM-N49浓度为30 μg/ml时才能诱导它显著性的组胺释放.TM-N49诱导大肠和肺肥大细胞组胺的释放10min和8min时达高峰,而扁桃体肥大细胞的组胺释放则在16min时达高峰.人大肠、肺和扁桃体肥大细胞经代谢抑制剂和百日咳毒素预先处理后,浓度低于30μg/ml的TM-N49诱导其释放组胺的作用明显减弱,但当其浓度达到30μg/ml时,上述处理对TM-N49诱导人肥大细胞释放组胺的作用无影响.缺乏外源性钙、镁离子时,TM-N49诱导肥大细胞释放组胺的能力也明显减弱.结论TM-N49可能通过G蛋白偶联受体途径激活人肥大细胞或通过细胞毒等途径作用于肥大细胞,从而参与毒蛇咬伤人体后所发生的病理生理过程.
목적탐색락철두사독TM-N49대인비대세포석방조알적유도작용급기궤제.방법용SP-Sephadex C-25,간소응효,Superdex75분자사급HPLC순화TM-N49.장수술절제적인폐、대장화편도체조직재37℃조건하용Ⅰ형효원매화Ⅰ형투명질산매소화,경현부후적세포균균지가입함TM-N49、자격제혹완충액적시관중,진행격발실험병용형광현색법측량상청액적조알수평.결과순화후적TM-N49재SDS-PAGE상정일조대.TM-N49능유도인폐、대장화편도체비대세포발생제량의뢰성조알석방.농도위0.3μg/ml시,TM-N49취능유도대장비대세포현저성적조알석방,단대우인폐비대세포래설,유도타석방상동량조알소수최저TM-N49농도위3μg/ml,이대우편도체비대세포,TM-N49농도위30 μg/ml시재능유도타현저성적조알석방.TM-N49유도대장화폐비대세포조알적석방10min화8min시체고봉,이편도체비대세포적조알석방칙재16min시체고봉.인대장、폐화편도체비대세포경대사억제제화백일해독소예선처리후,농도저우30μg/ml적TM-N49유도기석방조알적작용명현감약,단당기농도체도30μg/ml시,상술처리대TM-N49유도인비대세포석방조알적작용무영향.결핍외원성개、미리자시,TM-N49유도비대세포석방조알적능력야명현감약.결론TM-N49가능통과G단백우련수체도경격활인비대세포혹통과세포독등도경작용우비대세포,종이삼여독사교상인체후소발생적병리생리과정.