中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2007年
7期
496-500
,共5页
曹文尧%李江伟%吕芳%侯秋莲%张富春
曹文堯%李江偉%呂芳%侯鞦蓮%張富春
조문요%리강위%려방%후추련%장부춘
丹毒丝菌%spaA基因%克隆
丹毒絲菌%spaA基因%剋隆
단독사균%spaA기인%극륭
本研究以丹毒丝菌XJ1249基因组DNA为模板,根据GenBank已发表的丹毒丝菌表面保护性抗原A(SpaA)的序列设计引物进行PCR扩增,得到大小约1 029 bp的spaA基因N端免疫保护片段(spaA-N).将spaA-N连接到载体pGEX-4T-1上构建重组原核表达质粒pGEX-spaA-N,对重组质粒进行序列验证后,在IPTG的诱导下,表达和纯化重组蛋白r-SpaA-N,并研究其对小鼠的免疫保护作用.结果显示:分离纯化的重组蛋白具有免疫原性,并对小鼠具有免疫保护性,能够有效防止丹毒丝菌对小鼠的侵染.研究结果为进一步研究丹毒丝菌致病机理,开发新的猪丹毒诊断试剂盒和亚单位疫苗奠定了基础.
本研究以丹毒絲菌XJ1249基因組DNA為模闆,根據GenBank已髮錶的丹毒絲菌錶麵保護性抗原A(SpaA)的序列設計引物進行PCR擴增,得到大小約1 029 bp的spaA基因N耑免疫保護片段(spaA-N).將spaA-N連接到載體pGEX-4T-1上構建重組原覈錶達質粒pGEX-spaA-N,對重組質粒進行序列驗證後,在IPTG的誘導下,錶達和純化重組蛋白r-SpaA-N,併研究其對小鼠的免疫保護作用.結果顯示:分離純化的重組蛋白具有免疫原性,併對小鼠具有免疫保護性,能夠有效防止丹毒絲菌對小鼠的侵染.研究結果為進一步研究丹毒絲菌緻病機理,開髮新的豬丹毒診斷試劑盒和亞單位疫苗奠定瞭基礎.
본연구이단독사균XJ1249기인조DNA위모판,근거GenBank이발표적단독사균표면보호성항원A(SpaA)적서렬설계인물진행PCR확증,득도대소약1 029 bp적spaA기인N단면역보호편단(spaA-N).장spaA-N련접도재체pGEX-4T-1상구건중조원핵표체질립pGEX-spaA-N,대중조질립진행서렬험증후,재IPTG적유도하,표체화순화중조단백r-SpaA-N,병연구기대소서적면역보호작용.결과현시:분리순화적중조단백구유면역원성,병대소서구유면역보호성,능구유효방지단독사균대소서적침염.연구결과위진일보연구단독사균치병궤리,개발신적저단독진단시제합화아단위역묘전정료기출.
