分析测试学报
分析測試學報
분석측시학보
JOURNAL OF INSTRUMENTAL ANALYSIS
2011年
2期
146-151
,共6页
孙明忠%杨帆%侯志杰%郭春梅%郭一萌%刘淑清
孫明忠%楊帆%侯誌傑%郭春梅%郭一萌%劉淑清
손명충%양범%후지걸%곽춘매%곽일맹%류숙청
2,4-二硝基苯磺酸%职业暴露%2D-DIGE%HPLC-nESI MS/MS%HaCaT
2,4-二硝基苯磺痠%職業暴露%2D-DIGE%HPLC-nESI MS/MS%HaCaT
2,4-이초기분광산%직업폭로%2D-DIGE%HPLC-nESI MS/MS%HaCaT
采用Cy2、Cy3和Cy5荧光染料标记蛋白,建立了人角质形成细胞HaCaT受2,4-二硝基苯磺酸(DNBS)刺激前后的双向胶内差异凝胶电泳(2D-DIGE)图谱,每组平行样本数为3.凝胶采用蛋白荧光染料Deep Purple进行后染色(Post-stain).DeCyder定量分析软件在每块凝胶上平均检测到1 200个以上蛋白斑点,每块胶上都匹配得到的相同蛋白质斑点有846个.其中有7个斑点丰度变化在50%以上,统计学意义显著(P值小于0.05).利用高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-nESI MS/MS)成功鉴定5个表达上调的斑点分别为X染色体开放阅读框26(Cxorf26)、人辅分子伴侣23(PTGES3)、钙调蛋白(CALM3)、肌球蛋白轻链6(MYL6)和断裂点丛集区蛋白1(BANF1);2个表达下调蛋白斑点被鉴定为转录延伸因子B肽链2(TCEB2)和核糖体蛋白L23(RPL23).除MYL6被报道与皮肤疾病相关外,其它蛋白与皮肤病变的关系有待研究.该研究得到的7个差异表达蛋白为DNBS类化学致癌物职业接触者皮肤病变研究提供了有价值的线索.
採用Cy2、Cy3和Cy5熒光染料標記蛋白,建立瞭人角質形成細胞HaCaT受2,4-二硝基苯磺痠(DNBS)刺激前後的雙嚮膠內差異凝膠電泳(2D-DIGE)圖譜,每組平行樣本數為3.凝膠採用蛋白熒光染料Deep Purple進行後染色(Post-stain).DeCyder定量分析軟件在每塊凝膠上平均檢測到1 200箇以上蛋白斑點,每塊膠上都匹配得到的相同蛋白質斑點有846箇.其中有7箇斑點豐度變化在50%以上,統計學意義顯著(P值小于0.05).利用高效液相色譜-電噴霧串聯質譜(HPLC-nESI MS/MS)成功鑒定5箇錶達上調的斑點分彆為X染色體開放閱讀框26(Cxorf26)、人輔分子伴侶23(PTGES3)、鈣調蛋白(CALM3)、肌毬蛋白輕鏈6(MYL6)和斷裂點叢集區蛋白1(BANF1);2箇錶達下調蛋白斑點被鑒定為轉錄延伸因子B肽鏈2(TCEB2)和覈糖體蛋白L23(RPL23).除MYL6被報道與皮膚疾病相關外,其它蛋白與皮膚病變的關繫有待研究.該研究得到的7箇差異錶達蛋白為DNBS類化學緻癌物職業接觸者皮膚病變研究提供瞭有價值的線索.
채용Cy2、Cy3화Cy5형광염료표기단백,건립료인각질형성세포HaCaT수2,4-이초기분광산(DNBS)자격전후적쌍향효내차이응효전영(2D-DIGE)도보,매조평행양본수위3.응효채용단백형광염료Deep Purple진행후염색(Post-stain).DeCyder정량분석연건재매괴응효상평균검측도1 200개이상단백반점,매괴효상도필배득도적상동단백질반점유846개.기중유7개반점봉도변화재50%이상,통계학의의현저(P치소우0.05).이용고효액상색보-전분무천련질보(HPLC-nESI MS/MS)성공감정5개표체상조적반점분별위X염색체개방열독광26(Cxorf26)、인보분자반려23(PTGES3)、개조단백(CALM3)、기구단백경련6(MYL6)화단렬점총집구단백1(BANF1);2개표체하조단백반점피감정위전록연신인자B태련2(TCEB2)화핵당체단백L23(RPL23).제MYL6피보도여피부질병상관외,기타단백여피부병변적관계유대연구.해연구득도적7개차이표체단백위DNBS류화학치암물직업접촉자피부병변연구제공료유개치적선색.