中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2011年
3期
404-406
,共3页
赵俊峰%郑少斌%赵善超%姜耀东%肖耀军%杨旭凯
趙俊峰%鄭少斌%趙善超%薑耀東%肖耀軍%楊旭凱
조준봉%정소빈%조선초%강요동%초요군%양욱개
siRNA%G250基因%肾细胞癌%实时荧光定量逆转录聚合酶链反应
siRNA%G250基因%腎細胞癌%實時熒光定量逆轉錄聚閤酶鏈反應
siRNA%G250기인%신세포암%실시형광정량역전록취합매련반응
目的 评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测小干扰RNA(siRNA)表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250mRNA表达的可靠性,以建立稳定的RNAi技术.方法 体外合成四条针对G250基因的siRNA,并设计阴性对照和空白对照,转染肾癌786-0细胞株;根据G250mRNA的序列设计特异性引物,荧光染料SYBR Green Ⅰ法定量RT-PCR测定G250mRNA的表达情况.结果 四条siRNA分别使G250mRNA表达量降低了35.56%、49.27%、45.88%、65.13%,阴性对照和空白对照组无明显变化.结论 实时荧光定量RT-PCR技术可以准确地检测mRNA的表达,可以用来评价siRNA的有效性.
目的 評價實時熒光定量逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)法檢測小榦擾RNA(siRNA)錶達載體抑製人腎癌786-0細胞G250mRNA錶達的可靠性,以建立穩定的RNAi技術.方法 體外閤成四條針對G250基因的siRNA,併設計陰性對照和空白對照,轉染腎癌786-0細胞株;根據G250mRNA的序列設計特異性引物,熒光染料SYBR Green Ⅰ法定量RT-PCR測定G250mRNA的錶達情況.結果 四條siRNA分彆使G250mRNA錶達量降低瞭35.56%、49.27%、45.88%、65.13%,陰性對照和空白對照組無明顯變化.結論 實時熒光定量RT-PCR技術可以準確地檢測mRNA的錶達,可以用來評價siRNA的有效性.
목적 평개실시형광정량역전록취합매련반응(RT-PCR)법검측소간우RNA(siRNA)표체재체억제인신암786-0세포G250mRNA표체적가고성,이건립은정적RNAi기술.방법 체외합성사조침대G250기인적siRNA,병설계음성대조화공백대조,전염신암786-0세포주;근거G250mRNA적서렬설계특이성인물,형광염료SYBR Green Ⅰ법정량RT-PCR측정G250mRNA적표체정황.결과 사조siRNA분별사G250mRNA표체량강저료35.56%、49.27%、45.88%、65.13%,음성대조화공백대조조무명현변화.결론 실시형광정량RT-PCR기술가이준학지검측mRNA적표체,가이용래평개siRNA적유효성.
