南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2010年
12期
2658-2662
,共5页
张金平%王慧娟%史玉兰%王立轩%赵昱%郭艳红%赵春芳%张雷
張金平%王慧娟%史玉蘭%王立軒%趙昱%郭豔紅%趙春芳%張雷
장금평%왕혜연%사옥란%왕립헌%조욱%곽염홍%조춘방%장뢰
同源框基因%Nlac2-5%P19细胞%心肌标志物
同源框基因%Nlac2-5%P19細胞%心肌標誌物
동원광기인%Nlac2-5%P19세포%심기표지물
目的 研究同源框基因Nla2-5在心肌发生中的作用.方法 实验分转染组和未转染组,转染组细胞为稳定表达NIa2-5的P19细胞,未转染组细胞为P19细胞.两组细胞悬浮培养4d,形成聚集体后贴壁培养,于贴壁培养的4,8,12,16d,免疫细胞化学检测a横纹肌肌动蛋白(a-sarcomeric actin,a-SA)和心肌肌钙蛋白T (cardiac troponin T,cTnT)的表达;RT-PCR检测GATA-4,a-肌球蛋白重链(a-myosin heavy chain,a-MHC)、心房利钠因子(atrial natriuretic factor,ANF)基因的表达.结果 转染组a-SA和cTnT两种蛋白在聚集体贴壁的8,12,16 d出现表达,表达量有增高趋势;16d与8d比有显著差异(P<0.01) ; RT-PCR结果显示:转染组GATA-4在贴壁培养的4d有表达,8,12d表达逐渐增多.16d时表达有所下降.a-MHC和ANF在贴壁培养的8d有表达,12d和16d时表达逐渐增多.统计结果表明GATA-4在8,12,16d的表达量与4d比有显著差异(P<0.05或P<0.01),a-MHC在12,16d的表达量与8d比有显著差异(P<0.05,P<0.01),ANF在16d的表达量与8d比有显著差异(P<0.01),16d表达量与12d比也有显著差异(10.01);未转染组结果均为阴性.结论 外源表达Nla2-5基因可诱导P19细胞逐渐表达心肌标志物.
目的 研究同源框基因Nla2-5在心肌髮生中的作用.方法 實驗分轉染組和未轉染組,轉染組細胞為穩定錶達NIa2-5的P19細胞,未轉染組細胞為P19細胞.兩組細胞懸浮培養4d,形成聚集體後貼壁培養,于貼壁培養的4,8,12,16d,免疫細胞化學檢測a橫紋肌肌動蛋白(a-sarcomeric actin,a-SA)和心肌肌鈣蛋白T (cardiac troponin T,cTnT)的錶達;RT-PCR檢測GATA-4,a-肌毬蛋白重鏈(a-myosin heavy chain,a-MHC)、心房利鈉因子(atrial natriuretic factor,ANF)基因的錶達.結果 轉染組a-SA和cTnT兩種蛋白在聚集體貼壁的8,12,16 d齣現錶達,錶達量有增高趨勢;16d與8d比有顯著差異(P<0.01) ; RT-PCR結果顯示:轉染組GATA-4在貼壁培養的4d有錶達,8,12d錶達逐漸增多.16d時錶達有所下降.a-MHC和ANF在貼壁培養的8d有錶達,12d和16d時錶達逐漸增多.統計結果錶明GATA-4在8,12,16d的錶達量與4d比有顯著差異(P<0.05或P<0.01),a-MHC在12,16d的錶達量與8d比有顯著差異(P<0.05,P<0.01),ANF在16d的錶達量與8d比有顯著差異(P<0.01),16d錶達量與12d比也有顯著差異(10.01);未轉染組結果均為陰性.結論 外源錶達Nla2-5基因可誘導P19細胞逐漸錶達心肌標誌物.
목적 연구동원광기인Nla2-5재심기발생중적작용.방법 실험분전염조화미전염조,전염조세포위은정표체NIa2-5적P19세포,미전염조세포위P19세포.량조세포현부배양4d,형성취집체후첩벽배양,우첩벽배양적4,8,12,16d,면역세포화학검측a횡문기기동단백(a-sarcomeric actin,a-SA)화심기기개단백T (cardiac troponin T,cTnT)적표체;RT-PCR검측GATA-4,a-기구단백중련(a-myosin heavy chain,a-MHC)、심방리납인자(atrial natriuretic factor,ANF)기인적표체.결과 전염조a-SA화cTnT량충단백재취집체첩벽적8,12,16 d출현표체,표체량유증고추세;16d여8d비유현저차이(P<0.01) ; RT-PCR결과현시:전염조GATA-4재첩벽배양적4d유표체,8,12d표체축점증다.16d시표체유소하강.a-MHC화ANF재첩벽배양적8d유표체,12d화16d시표체축점증다.통계결과표명GATA-4재8,12,16d적표체량여4d비유현저차이(P<0.05혹P<0.01),a-MHC재12,16d적표체량여8d비유현저차이(P<0.05,P<0.01),ANF재16d적표체량여8d비유현저차이(P<0.01),16d표체량여12d비야유현저차이(10.01);미전염조결과균위음성.결론 외원표체Nla2-5기인가유도P19세포축점표체심기표지물.
