海洋学报（中文版）
海洋學報（中文版）
해양학보（중문판）
ACTA OCEANOLOGICA SINICA
2011年
5期
133-138
,共6页
焦豫良%王淑军%吕明生%房耀维%刘姝
焦豫良%王淑軍%呂明生%房耀維%劉姝
초예량%왕숙군%려명생%방요유%류주
高温淀粉普鲁兰酶%异源表达%酶活分析
高溫澱粉普魯蘭酶%異源錶達%酶活分析
고온정분보로란매%이원표체%매활분석
深海热液口厌氧古菌Thermococcus siculi HJ21中的高温淀粉普鲁兰酶进行分子进化树系分析,并在大肠杆菌中通过pMal-c2x载体表达并纯化其N端催化结构域.通过融合表达,在N端催化结构域的N端融合有麦芽糖结合蛋白MalE.对该融合蛋白的α-淀粉酶和普鲁兰酶活性进行了实验分析.融合蛋白的两种酶活的最适温度均为100℃,淀粉酶和普鲁兰酶活性的最适pH值分别为5和6,比活力分别为6.5和11.5 U/mg.结果表明,高温淀粉普鲁兰酶的α-淀粉酶活性相对较弱,其C端578个氨基酸构成的区域非两种酶活性所必需的结构.本研究中获得的高温淀粉普鲁兰酶融合蛋白在工业酶法制糖中可以进一步和高温α-淀粉酶配合使用.
深海熱液口厭氧古菌Thermococcus siculi HJ21中的高溫澱粉普魯蘭酶進行分子進化樹繫分析,併在大腸桿菌中通過pMal-c2x載體錶達併純化其N耑催化結構域.通過融閤錶達,在N耑催化結構域的N耑融閤有麥芽糖結閤蛋白MalE.對該融閤蛋白的α-澱粉酶和普魯蘭酶活性進行瞭實驗分析.融閤蛋白的兩種酶活的最適溫度均為100℃,澱粉酶和普魯蘭酶活性的最適pH值分彆為5和6,比活力分彆為6.5和11.5 U/mg.結果錶明,高溫澱粉普魯蘭酶的α-澱粉酶活性相對較弱,其C耑578箇氨基痠構成的區域非兩種酶活性所必需的結構.本研究中穫得的高溫澱粉普魯蘭酶融閤蛋白在工業酶法製糖中可以進一步和高溫α-澱粉酶配閤使用.
심해열액구염양고균Thermococcus siculi HJ21중적고온정분보로란매진행분자진화수계분석,병재대장간균중통과pMal-c2x재체표체병순화기N단최화결구역.통과융합표체,재N단최화결구역적N단융합유맥아당결합단백MalE.대해융합단백적α-정분매화보로란매활성진행료실험분석.융합단백적량충매활적최괄온도균위100℃,정분매화보로란매활성적최괄pH치분별위5화6,비활력분별위6.5화11.5 U/mg.결과표명,고온정분보로란매적α-정분매활성상대교약,기C단578개안기산구성적구역비량충매활성소필수적결구.본연구중획득적고온정분보로란매융합단백재공업매법제당중가이진일보화고온α-정분매배합사용.
