中华泌尿外科杂志
中華泌尿外科雜誌
중화비뇨외과잡지
CHINESE JOURNAL OF UROLOGY
2007年
7期
463-466
,共4页
宫大鑫%何舜发%孙志熙%孔垂泽
宮大鑫%何舜髮%孫誌熙%孔垂澤
궁대흠%하순발%손지희%공수택
反义寡核苷酸%肾肿瘤%存活素%凋亡
反義寡覈苷痠%腎腫瘤%存活素%凋亡
반의과핵감산%신종류%존활소%조망
目的 观察存活素反义寡核苷酸封闭存活素的表达对肾癌细胞凋亡的影响.方法 采用脂质体介导的存活素反义寡核苷酸技术转染肾癌细胞786-0.电镜观察细胞超微结构,免疫组织化学、Western blot及RT-PCR方法检测存活素蛋白及mRNA表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率,四甲基偶氮唑盐比色法检测癌细胞抑制率.酶标免疫测定caspase-3活性.结果 存活素反义寡核苷酸能显著降低存活素蛋白和mRNA的表达,并呈浓度和时间依赖效应.转染后的肾癌细胞出现了大量凋亡小体.400、600、800 ng/ml反义寡核苷酸细胞凋亡率分别为(10.54±0.72)%,(12.80±0.38)%,(22.30±1.23)%,较空白对照组[(6.05±0.48)%]和正义对照组[(5.70±0.41)%]显著增加(P＜0.05).反义寡核苷酸各组caspase-3的相对活性分别为0.052±0.009,0.078±0.004和0.092±0.002,与空白对照组(0.027±0.008)和正义对照组(0.028±0.001)相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 存活素反义寡核苷酸能显著下凋存活素基因表达,明显促进肾癌细胞786-0凋亡并抑制其增殖;可能是通过上调caspase-3表达来促进凋亡.
目的 觀察存活素反義寡覈苷痠封閉存活素的錶達對腎癌細胞凋亡的影響.方法 採用脂質體介導的存活素反義寡覈苷痠技術轉染腎癌細胞786-0.電鏡觀察細胞超微結構,免疫組織化學、Western blot及RT-PCR方法檢測存活素蛋白及mRNA錶達,流式細胞儀檢測細胞凋亡率,四甲基偶氮唑鹽比色法檢測癌細胞抑製率.酶標免疫測定caspase-3活性.結果 存活素反義寡覈苷痠能顯著降低存活素蛋白和mRNA的錶達,併呈濃度和時間依賴效應.轉染後的腎癌細胞齣現瞭大量凋亡小體.400、600、800 ng/ml反義寡覈苷痠細胞凋亡率分彆為(10.54±0.72)%,(12.80±0.38)%,(22.30±1.23)%,較空白對照組[(6.05±0.48)%]和正義對照組[(5.70±0.41)%]顯著增加(P＜0.05).反義寡覈苷痠各組caspase-3的相對活性分彆為0.052±0.009,0.078±0.004和0.092±0.002,與空白對照組(0.027±0.008)和正義對照組(0.028±0.001)相比,差異有統計學意義(P＜0.05).結論 存活素反義寡覈苷痠能顯著下凋存活素基因錶達,明顯促進腎癌細胞786-0凋亡併抑製其增殖;可能是通過上調caspase-3錶達來促進凋亡.
목적 관찰존활소반의과핵감산봉폐존활소적표체대신암세포조망적영향.방법 채용지질체개도적존활소반의과핵감산기술전염신암세포786-0.전경관찰세포초미결구,면역조직화학、Western blot급RT-PCR방법검측존활소단백급mRNA표체,류식세포의검측세포조망솔,사갑기우담서염비색법검측암세포억제솔.매표면역측정caspase-3활성.결과 존활소반의과핵감산능현저강저존활소단백화mRNA적표체,병정농도화시간의뢰효응.전염후적신암세포출현료대량조망소체.400、600、800 ng/ml반의과핵감산세포조망솔분별위(10.54±0.72)%,(12.80±0.38)%,(22.30±1.23)%,교공백대조조[(6.05±0.48)%]화정의대조조[(5.70±0.41)%]현저증가(P＜0.05).반의과핵감산각조caspase-3적상대활성분별위0.052±0.009,0.078±0.004화0.092±0.002,여공백대조조(0.027±0.008)화정의대조조(0.028±0.001)상비,차이유통계학의의(P＜0.05).결론 존활소반의과핵감산능현저하조존활소기인표체,명현촉진신암세포786-0조망병억제기증식;가능시통과상조caspase-3표체래촉진조망.
