中华外科杂志
中華外科雜誌
중화외과잡지
CHINESE JOURNAL OF SURGERY
2003年
3期
193-196
,共4页
吴杰裕%肖能坎%黄巧冰%黄绪亮%石胜军%肖添有%刘洪
吳傑裕%肖能坎%黃巧冰%黃緒亮%石勝軍%肖添有%劉洪
오걸유%초능감%황교빙%황서량%석성군%초첨유%류홍
休克,脓毒性%脂多糖类%内皮,血管%蛋白激酶类
休剋,膿毒性%脂多糖類%內皮,血管%蛋白激酶類
휴극,농독성%지다당류%내피,혈관%단백격매류
目的探讨内毒素休克发病机制中蛋白激酶G(PKG)的作用. 方法用脂多糖(LPS)刺激培养的内皮细胞,通过细胞裂解和离心获得细胞裂解液,用放射性同位素法标记法检测PKG的活性.同时采用特异性荧光染色法检测LPS刺激后细胞内肌动蛋白微丝(F-actin)的结构和分布变化.用PKG特异性抑制剂KT5823预处理细胞后,再检测LPS介导的细胞内PKG活性和F-actin的变化.以空白组为阴性对照,以PKG激动剂8-Br-cGMP刺激细胞作为阳性对照组. 结果 LPS分别刺激5、10、30和60 min后细胞内PKG活力呈时间依赖性的增高(与空白组相比P<0.01), 细胞内的F-actin出现极性分布;而KT5823预刺激20 min后再用LPS刺激没有出现上述变化.PKG的激动剂8-Br-cGMP刺激细胞后的变化与LPS的刺激相似. 结论 LPS可以介导血管内皮细胞PKG的激活和F-actin的应力性变化;内毒素休克后内皮细胞通透性增高与cGMP-PKG通路的激活有关.
目的探討內毒素休剋髮病機製中蛋白激酶G(PKG)的作用. 方法用脂多糖(LPS)刺激培養的內皮細胞,通過細胞裂解和離心穫得細胞裂解液,用放射性同位素法標記法檢測PKG的活性.同時採用特異性熒光染色法檢測LPS刺激後細胞內肌動蛋白微絲(F-actin)的結構和分佈變化.用PKG特異性抑製劑KT5823預處理細胞後,再檢測LPS介導的細胞內PKG活性和F-actin的變化.以空白組為陰性對照,以PKG激動劑8-Br-cGMP刺激細胞作為暘性對照組. 結果 LPS分彆刺激5、10、30和60 min後細胞內PKG活力呈時間依賴性的增高(與空白組相比P<0.01), 細胞內的F-actin齣現極性分佈;而KT5823預刺激20 min後再用LPS刺激沒有齣現上述變化.PKG的激動劑8-Br-cGMP刺激細胞後的變化與LPS的刺激相似. 結論 LPS可以介導血管內皮細胞PKG的激活和F-actin的應力性變化;內毒素休剋後內皮細胞通透性增高與cGMP-PKG通路的激活有關.
목적탐토내독소휴극발병궤제중단백격매G(PKG)적작용. 방법용지다당(LPS)자격배양적내피세포,통과세포렬해화리심획득세포렬해액,용방사성동위소법표기법검측PKG적활성.동시채용특이성형광염색법검측LPS자격후세포내기동단백미사(F-actin)적결구화분포변화.용PKG특이성억제제KT5823예처리세포후,재검측LPS개도적세포내PKG활성화F-actin적변화.이공백조위음성대조,이PKG격동제8-Br-cGMP자격세포작위양성대조조. 결과 LPS분별자격5、10、30화60 min후세포내PKG활력정시간의뢰성적증고(여공백조상비P<0.01), 세포내적F-actin출현겁성분포;이KT5823예자격20 min후재용LPS자격몰유출현상술변화.PKG적격동제8-Br-cGMP자격세포후적변화여LPS적자격상사. 결론 LPS가이개도혈관내피세포PKG적격활화F-actin적응력성변화;내독소휴극후내피세포통투성증고여cGMP-PKG통로적격활유관.
