天津医科大学学报
天津醫科大學學報
천진의과대학학보
JOURNAL OF TIANJIN MEDICAL UNIVERSITY
2005年
2期
171-174
,共4页
腺病毒载体%大肠杆菌%同源重组%化学转化法
腺病毒載體%大腸桿菌%同源重組%化學轉化法
선병독재체%대장간균%동원중조%화학전화법
目的:建立构建重组腺病毒载体的简易、廉价、高效方法,为进一步应用含自杀基因的重组腺病毒治疗恶性肿瘤奠定基础.方法:Pme Ⅰ线性化腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV、切胶纯化,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1按一定比例混合后,以化学转化法导入大肠杆菌BJ 5 183,在菌内进行同源重组,构建重组腺病毒质粒rpAdEasyGFP.以脂质体法将重组质粒转染293细胞包装重组腺病毒radGFP.结果:细菌内同源重组率高达80%;在293细胞中成功产生重组腺病毒.结论:对目前应用广泛的AdEasy系统进行了有效改进,在获得较高阳性重组率的同时,降低了对实验室设备的要求.
目的:建立構建重組腺病毒載體的簡易、廉價、高效方法,為進一步應用含自殺基因的重組腺病毒治療噁性腫瘤奠定基礎.方法:Pme Ⅰ線性化腺病毒穿梭質粒pAdTrack-CMV、切膠純化,與腺病毒骨架質粒pAdEasy-1按一定比例混閤後,以化學轉化法導入大腸桿菌BJ 5 183,在菌內進行同源重組,構建重組腺病毒質粒rpAdEasyGFP.以脂質體法將重組質粒轉染293細胞包裝重組腺病毒radGFP.結果:細菌內同源重組率高達80%;在293細胞中成功產生重組腺病毒.結論:對目前應用廣汎的AdEasy繫統進行瞭有效改進,在穫得較高暘性重組率的同時,降低瞭對實驗室設備的要求.
목적:건립구건중조선병독재체적간역、렴개、고효방법,위진일보응용함자살기인적중조선병독치료악성종류전정기출.방법:Pme Ⅰ선성화선병독천사질립pAdTrack-CMV、절효순화,여선병독골가질립pAdEasy-1안일정비례혼합후,이화학전화법도입대장간균BJ 5 183,재균내진행동원중조,구건중조선병독질립rpAdEasyGFP.이지질체법장중조질립전염293세포포장중조선병독radGFP.결과:세균내동원중조솔고체80%;재293세포중성공산생중조선병독.결론:대목전응용엄범적AdEasy계통진행료유효개진,재획득교고양성중조솔적동시,강저료대실험실설비적요구.
