西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2005年
3期
11-15
,共5页
徐学清%曹瑞兵%蔡梅红%任雪枫%周斌%陈溥言
徐學清%曹瑞兵%蔡梅紅%任雪楓%週斌%陳溥言
서학청%조서병%채매홍%임설풍%주빈%진부언
巴斯德毕赤酵母%猪瘟病毒E2蛋白%A/D抗原区%表达条件%条件优化
巴斯德畢赤酵母%豬瘟病毒E2蛋白%A/D抗原區%錶達條件%條件優化
파사덕필적효모%저온병독E2단백%A/D항원구%표체조건%조건우화
对含猪瘟病毒E2蛋白A/D抗原区基因插入的重组酵母菌株进行诱导表达,通过对诱导时间、重组酵母菌株、菌体密度、培养液pH、甲醇剂量等培养条件与表达产量关系的分析,对重组蛋白的表达条件进行了优化.优化后的条件为:28～30 ℃,225 r/min振荡培养至BMGY中菌体OD600值为3.0～3.5时,将菌体转入相当于4倍体积BMGY,pH为6.0的BMMY培养基中培养72 h,每24 h加入甲醇至终浓度为总体积的0.5%～1.0%.在此优化条件下,重组蛋白的表达量可达275.38μg/mL,比较温度对重组蛋白降解率的影响后发现,培养物上清液应保存于-20 ℃.
對含豬瘟病毒E2蛋白A/D抗原區基因插入的重組酵母菌株進行誘導錶達,通過對誘導時間、重組酵母菌株、菌體密度、培養液pH、甲醇劑量等培養條件與錶達產量關繫的分析,對重組蛋白的錶達條件進行瞭優化.優化後的條件為:28～30 ℃,225 r/min振盪培養至BMGY中菌體OD600值為3.0～3.5時,將菌體轉入相噹于4倍體積BMGY,pH為6.0的BMMY培養基中培養72 h,每24 h加入甲醇至終濃度為總體積的0.5%～1.0%.在此優化條件下,重組蛋白的錶達量可達275.38μg/mL,比較溫度對重組蛋白降解率的影響後髮現,培養物上清液應保存于-20 ℃.
대함저온병독E2단백A/D항원구기인삽입적중조효모균주진행유도표체,통과대유도시간、중조효모균주、균체밀도、배양액pH、갑순제량등배양조건여표체산량관계적분석,대중조단백적표체조건진행료우화.우화후적조건위:28～30 ℃,225 r/min진탕배양지BMGY중균체OD600치위3.0～3.5시,장균체전입상당우4배체적BMGY,pH위6.0적BMMY배양기중배양72 h,매24 h가입갑순지종농도위총체적적0.5%～1.0%.재차우화조건하,중조단백적표체량가체275.38μg/mL,비교온도대중조단백강해솔적영향후발현,배양물상청액응보존우-20 ℃.
