中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2007年
6期
527-531
,共5页
郭永利%陈毅歆%黄德党%罗海峰%葛胜祥%程通%张军%夏宁邵
郭永利%陳毅歆%黃德黨%囉海峰%葛勝祥%程通%張軍%夏寧邵
곽영리%진의흠%황덕당%라해봉%갈성상%정통%장군%하저소
HIV-1%p24蛋白%单克隆抗体%夹心ELISA
HIV-1%p24蛋白%單剋隆抗體%夾心ELISA
HIV-1%p24단백%단극륭항체%협심ELISA
目的 制备抗HIV-1 p24单克隆抗体(单抗,McAb),并利用双抗体夹心ELISA法建立HIV-1 p24抗原检测试剂.方法 以基因工程原核重组抗原HIV-1 p24蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法制备单克隆抗体,单抗经纯化和HRP标记后,利用双抗体夹心ELISA筛选检测p24蛋白的最佳配伍单抗以期建立HIV-1 p24抗原检测试剂.结果 成功筛选到16株稳定分泌抗HIV-1 p24单抗的杂交瘤细胞株,并从中筛选出最佳单抗配伍组合"16G12+2F2b-HRP",该组合对p24蛋白的检测灵敏度为20 pg/mL,对感染性克隆pNL4-3表达的HIV病毒培养上清检测呈阳性,对100份HIV阴性人血清无非特异性反应,显示出良好的检测灵敏度和特异性.结论 本研究初步成功地建立了HIV-1 p24抗原的检测试剂,并为最终建立HIV第四代诊断试剂(HIV Ag/Ab Assay)奠定了坚实的基础.
目的 製備抗HIV-1 p24單剋隆抗體(單抗,McAb),併利用雙抗體夾心ELISA法建立HIV-1 p24抗原檢測試劑.方法 以基因工程原覈重組抗原HIV-1 p24蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常規雜交瘤技術和間接ELISA法製備單剋隆抗體,單抗經純化和HRP標記後,利用雙抗體夾心ELISA篩選檢測p24蛋白的最佳配伍單抗以期建立HIV-1 p24抗原檢測試劑.結果 成功篩選到16株穩定分泌抗HIV-1 p24單抗的雜交瘤細胞株,併從中篩選齣最佳單抗配伍組閤"16G12+2F2b-HRP",該組閤對p24蛋白的檢測靈敏度為20 pg/mL,對感染性剋隆pNL4-3錶達的HIV病毒培養上清檢測呈暘性,對100份HIV陰性人血清無非特異性反應,顯示齣良好的檢測靈敏度和特異性.結論 本研究初步成功地建立瞭HIV-1 p24抗原的檢測試劑,併為最終建立HIV第四代診斷試劑(HIV Ag/Ab Assay)奠定瞭堅實的基礎.
목적 제비항HIV-1 p24단극륭항체(단항,McAb),병이용쌍항체협심ELISA법건립HIV-1 p24항원검측시제.방법 이기인공정원핵중조항원HIV-1 p24단백면역BALB/c소서,이용상규잡교류기술화간접ELISA법제비단극륭항체,단항경순화화HRP표기후,이용쌍항체협심ELISA사선검측p24단백적최가배오단항이기건립HIV-1 p24항원검측시제.결과 성공사선도16주은정분비항HIV-1 p24단항적잡교류세포주,병종중사선출최가단항배오조합"16G12+2F2b-HRP",해조합대p24단백적검측령민도위20 pg/mL,대감염성극륭pNL4-3표체적HIV병독배양상청검측정양성,대100빈HIV음성인혈청무비특이성반응,현시출량호적검측령민도화특이성.결론 본연구초보성공지건립료HIV-1 p24항원적검측시제,병위최종건립HIV제사대진단시제(HIV Ag/Ab Assay)전정료견실적기출.
