口蹄疫病毒非结构蛋白3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测
구제역병독비결구단백3A、3B화2C기인적표체급산물순화여활성검측
Purification and reactivity of Foot-and-Mouth Disease Virus non-structural protein 3A, 3B and 2C expressed in E. coli
  • 万方数据
    微生物学报 미생물학보
    ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
    2008年 6期 790-795 ,共6页

    付元芳%卢曾军%曹轶梅%郭建宏%张小丽%田美娜%刘在新%才学鹏

    부원방%로증군%조질매%곽건굉%장소려%전미나%류재신%재학붕

    口蹄疫病毒%非结构蛋白%酶联免疫电转移印迹技术(EITB) 口蹄疫病毒%非結構蛋白%酶聯免疫電轉移印跡技術(EITB)
    구제역병독%비결구단백%매련면역전전이인적기술(EITB)
    [目的]口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测.[方法]利用原核表达系统表达了FMDV NSP 3A、3B和富含B细胞抗原位点序列的2C蛋白.利用高浓度尿素裂解包涵体,采用稀释法和氧化型、还原型谷胱甘肽系统相结合方法对2C蛋白进行复性.用金属鳌合亲合层析的方法对表达的FMDV NSP 3A、3B和2C进行纯化.采用ELISA方法对比检测了3种纯化蛋白在检测羊血清NSP抗体的效果.[结果]检测得知3A和3B为可溶性表达蛋白,2C以包涵体形式表达.通过Western-blot分析,表明纯化后蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应.纯化的3A、3B和复性后的2C融合蛋白与3ABC抗原的检测结果具有很高的符合性.[结论]该研究为建立鉴别FMDV自然感染动物和灭活疫苗免疫动物的酶联免疫电转移印迹技术(EITB)提供了所需的材料.
    [목적]구제역병독(FMDV)비결구단백(NSP)3A、3B화2C기인적표체급산물순화여활성검측.[방법]이용원핵표체계통표체료FMDV NSP 3A、3B화부함B세포항원위점서렬적2C단백.이용고농도뇨소렬해포함체,채용희석법화양화형、환원형곡광감태계통상결합방법대2C단백진행복성.용금속오합친합층석적방법대표체적FMDV NSP 3A、3B화2C진행순화.채용ELISA방법대비검측료3충순화단백재검측양혈청NSP항체적효과.[결과]검측득지3A화3B위가용성표체단백,2C이포함체형식표체.통과Western-blot분석,표명순화후단백능여FMDV감염동물혈청발생특이성반응.순화적3A、3B화복성후적2C융합단백여3ABC항원적검측결과구유흔고적부합성.[결론]해연구위건립감별FMDV자연감염동물화멸활역묘면역동물적매련면역전전이인적기술(EITB)제공료소수적재료.
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