CAJ | 학술논문

背景:生理条件下机体内多数骨髓间充质干细胞增殖并不明显,然而在一定刺激下可表现出旺盛的有丝分裂活动,具有很强的增殖倍增能力,且体外实验表明其具有多向分化潜能.目的:进一步验证体外分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖与多向分化潜能.方法:全骨髓法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,贴壁筛选法进行纯化,倒置相差显微镜下观察细胞形态及生长特征,MTT法绘制细胞生长曲线,免疫组化法对细胞表面干细胞标志CD44进行鉴定.取传至第4代细胞,分别用成骨、成软骨、成脂肪和成神经诱导剂予以培养,通过碱性磷酸酶染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色、油红O染色、NeuN抗体免疫组化染色进行分化能力鉴定.结果与结论:分离培养的细胞呈长梭形或多边形,细胞生长曲线呈S形,群体倍增时间约为31 h,免疫细胞化学染色后CD44呈阳性表达,CD34呈阴性.第4代骨髓间充质干细胞成骨诱导2周后出现钙盐沉积,成软骨诱导培养2周后Ⅱ型胶原检测呈阳性,成脂肪诱导培养2周后在细胞的胞浆内充满大量红色脂肪滴,成神经诱导6 h后细胞出现突起,类似神经元的轴突和树突纤维,NeuN免疫组化染色呈阳性.表明体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖能力旺盛,可向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、神经元样细胞方向分化.
배경:생리조건하궤체내다수골수간충질간세포증식병불명현,연이재일정자격하가표현출왕성적유사분렬활동,구유흔강적증식배증능력,차체외실험표명기구유다향분화잠능.목적:진일보험증체외분리배양적대서골수간충질간세포생장증식여다향분화잠능.방법:전골수법체외분리배양대서골수간충질간세포,첩벽사선법진행순화,도치상차현미경하관찰세포형태급생장특정,MTT법회제세포생장곡선,면역조화법대세포표면간세포표지CD44진행감정.취전지제4대세포,분별용성골、성연골、성지방화성신경유도제여이배양,통과감성린산매염색、Ⅱ형효원면역조화염색、유홍O염색、NeuN항체면역조화염색진행분화능력감정.결과여결론:분리배양적세포정장사형혹다변형,세포생장곡선정S형,군체배증시간약위31 h,면역세포화학염색후CD44정양성표체,CD34정음성.제4대골수간충질간세포성골유도2주후출현개염침적,성연골유도배양2주후Ⅱ형효원검측정양성,성지방유도배양2주후재세포적포장내충만대량홍색지방적,성신경유도6 h후세포출현돌기,유사신경원적축돌화수돌섬유,NeuN면역조화염색정양성.표명체외배양적대서골수간충질간세포생장증식능력왕성,가향성골세포、연골세포、지방세포、신경원양세포방향분화.