中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2011年
4期
52-55
,共4页
袁伟%刘江宁%向志光%林树柱%张丽芳%秦川
袁偉%劉江寧%嚮誌光%林樹柱%張麗芳%秦川
원위%류강저%향지광%림수주%장려방%진천
结核分枝杆菌%Ag85B%Esat6%HspX
結覈分枝桿菌%Ag85B%Esat6%HspX
결핵분지간균%Ag85B%Esat6%HspX
目的 构建结核分枝杆菌Ag85B-Esat6-HspX融合基因,并对其在体外真核细胞中进行表达.方法 用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv株基因组中分别扩增Ag85B、Esat6、HspX基因,插入到pUC19一T载体,序列测定正确后,将融合基因再次克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-).重组质粒经酶切鉴定并测序正确后,用MegaTran1.0转染293T细胞,并用Western-Blot检测目的蛋白的表达.结果 Western-blot检测到分子量大小约65 kDa的目的蛋白.结论 成功地构建了结核分枝杆菌Ag85B-Esat6-HspX融合基因的真核表达载体,且该重组载体可在体外真核细胞中获得特异性的表达.
目的 構建結覈分枝桿菌Ag85B-Esat6-HspX融閤基因,併對其在體外真覈細胞中進行錶達.方法 用PCR法從結覈分枝桿菌H37Rv株基因組中分彆擴增Ag85B、Esat6、HspX基因,插入到pUC19一T載體,序列測定正確後,將融閤基因再次剋隆到真覈錶達載體pcDNA3.1(-).重組質粒經酶切鑒定併測序正確後,用MegaTran1.0轉染293T細胞,併用Western-Blot檢測目的蛋白的錶達.結果 Western-blot檢測到分子量大小約65 kDa的目的蛋白.結論 成功地構建瞭結覈分枝桿菌Ag85B-Esat6-HspX融閤基因的真覈錶達載體,且該重組載體可在體外真覈細胞中穫得特異性的錶達.
목적 구건결핵분지간균Ag85B-Esat6-HspX융합기인,병대기재체외진핵세포중진행표체.방법 용PCR법종결핵분지간균H37Rv주기인조중분별확증Ag85B、Esat6、HspX기인,삽입도pUC19일T재체,서렬측정정학후,장융합기인재차극륭도진핵표체재체pcDNA3.1(-).중조질립경매절감정병측서정학후,용MegaTran1.0전염293T세포,병용Western-Blot검측목적단백적표체.결과 Western-blot검측도분자량대소약65 kDa적목적단백.결론 성공지구건료결핵분지간균Ag85B-Esat6-HspX융합기인적진핵표체재체,차해중조재체가재체외진핵세포중획득특이성적표체.
