中国公共卫生
中國公共衛生
중국공공위생
CHINA PUBLIC HEALTH
2004年
2期
150-152
,共3页
李孜%余新炳%吴忠道%徐劲%彭寨玉%田春林%赵霞
李孜%餘新炳%吳忠道%徐勁%彭寨玉%田春林%趙霞
리자%여신병%오충도%서경%팽채옥%전춘림%조하
日本血吸虫%中国大陆株%精氨酸酶%克隆%序列分析
日本血吸蟲%中國大陸株%精氨痠酶%剋隆%序列分析
일본혈흡충%중국대륙주%정안산매%극륭%서렬분석
目的获取并真核克隆日本血吸虫新基因精氨酸酶全长cDNA.方法对本实验室曾获得精氨酸酶基因利用生物信息学进行分析,发现其5'端尚缺一段序列;根据已知序列设计引物,用5'端单巢式PCR从尾蚴文库中扩增,以获得精氨酸酶基因完整的阅读框(ORF);用生物信息学技术对获得的精氨酸酶编码基因进行结构与功能的分析;并将新基因的完整编码阅读框克隆入真核表达载体pCDNA3.1.结果用5'端单巢式PCR从尾蚴文库中获得了精氨酸酶5'端所缺序列,得到其完整的ORF,其ORF长1 095 bp,编码364个氨基酸.利用生物信息学技术鉴定其为日本血吸虫精氨酸酶的完整cDNA序列.重组质粒经双酶切DCR及测序鉴定证明日本血吸虫精氨酸酶真核表达质粒构建成功.结论成功获得、识别、扩增并克隆日本血吸虫精氨酸酶编码基因的全长cDNA.
目的穫取併真覈剋隆日本血吸蟲新基因精氨痠酶全長cDNA.方法對本實驗室曾穫得精氨痠酶基因利用生物信息學進行分析,髮現其5'耑尚缺一段序列;根據已知序列設計引物,用5'耑單巢式PCR從尾蚴文庫中擴增,以穫得精氨痠酶基因完整的閱讀框(ORF);用生物信息學技術對穫得的精氨痠酶編碼基因進行結構與功能的分析;併將新基因的完整編碼閱讀框剋隆入真覈錶達載體pCDNA3.1.結果用5'耑單巢式PCR從尾蚴文庫中穫得瞭精氨痠酶5'耑所缺序列,得到其完整的ORF,其ORF長1 095 bp,編碼364箇氨基痠.利用生物信息學技術鑒定其為日本血吸蟲精氨痠酶的完整cDNA序列.重組質粒經雙酶切DCR及測序鑒定證明日本血吸蟲精氨痠酶真覈錶達質粒構建成功.結論成功穫得、識彆、擴增併剋隆日本血吸蟲精氨痠酶編碼基因的全長cDNA.
목적획취병진핵극륭일본혈흡충신기인정안산매전장cDNA.방법대본실험실증획득정안산매기인이용생물신식학진행분석,발현기5'단상결일단서렬;근거이지서렬설계인물,용5'단단소식PCR종미유문고중확증,이획득정안산매기인완정적열독광(ORF);용생물신식학기술대획득적정안산매편마기인진행결구여공능적분석;병장신기인적완정편마열독광극륭입진핵표체재체pCDNA3.1.결과용5'단단소식PCR종미유문고중획득료정안산매5'단소결서렬,득도기완정적ORF,기ORF장1 095 bp,편마364개안기산.이용생물신식학기술감정기위일본혈흡충정안산매적완정cDNA서렬.중조질립경쌍매절DCR급측서감정증명일본혈흡충정안산매진핵표체질립구건성공.결론성공획득、식별、확증병극륭일본혈흡충정안산매편마기인적전장cDNA.
