免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2005年
4期
341-344
,共4页
汤兆明%郭永建%卓孝福%苏东辉%王长青
湯兆明%郭永建%卓孝福%囌東輝%王長青
탕조명%곽영건%탁효복%소동휘%왕장청
丙型肝炎病毒%噬菌体展示肽库%B细胞表位
丙型肝炎病毒%噬菌體展示肽庫%B細胞錶位
병형간염병독%서균체전시태고%B세포표위
目的用患者血清中抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体从噬菌体展示随机12肽库筛选HCV抗原表位.方法用硫酸铵粗提HCV患者血清中Ig后用DEAE-Sephadex A50层析纯化并作为筛选的配基;对噬菌体展示随机12肽库采用配基亲和富集、阴性血清吸收的方法进行生物淘洗;ELISA鉴定筛选克隆的结合特性;测定阳性克隆所携带DNA序列并进行计算机辅助分析.结果三轮生物淘洗后特异性克隆得到了富集.用第3轮淘洗出的26个克隆进行结合实验,其中有3个克隆与HCV患者血清结合力较高而与正常人血清结合能力较弱;序列分析发现2个序列与HCV蛋白第1 082～1 093和1 954～1 965位(1082YHGAGTRTIASP 1093和1954TQLLRRLHQWIS 1965)氨基酸有较高的同源性;计算机辅助分析提示这两个位点具有形成表位的性质.结论获得了两个HCV抗原表位,在HCV感染的检测中具有潜在的应用价值.
目的用患者血清中抗丙型肝炎病毒(HCV)抗體從噬菌體展示隨機12肽庫篩選HCV抗原錶位.方法用硫痠銨粗提HCV患者血清中Ig後用DEAE-Sephadex A50層析純化併作為篩選的配基;對噬菌體展示隨機12肽庫採用配基親和富集、陰性血清吸收的方法進行生物淘洗;ELISA鑒定篩選剋隆的結閤特性;測定暘性剋隆所攜帶DNA序列併進行計算機輔助分析.結果三輪生物淘洗後特異性剋隆得到瞭富集.用第3輪淘洗齣的26箇剋隆進行結閤實驗,其中有3箇剋隆與HCV患者血清結閤力較高而與正常人血清結閤能力較弱;序列分析髮現2箇序列與HCV蛋白第1 082～1 093和1 954～1 965位(1082YHGAGTRTIASP 1093和1954TQLLRRLHQWIS 1965)氨基痠有較高的同源性;計算機輔助分析提示這兩箇位點具有形成錶位的性質.結論穫得瞭兩箇HCV抗原錶位,在HCV感染的檢測中具有潛在的應用價值.
목적용환자혈청중항병형간염병독(HCV)항체종서균체전시수궤12태고사선HCV항원표위.방법용류산안조제HCV환자혈청중Ig후용DEAE-Sephadex A50층석순화병작위사선적배기;대서균체전시수궤12태고채용배기친화부집、음성혈청흡수적방법진행생물도세;ELISA감정사선극륭적결합특성;측정양성극륭소휴대DNA서렬병진행계산궤보조분석.결과삼륜생물도세후특이성극륭득도료부집.용제3륜도세출적26개극륭진행결합실험,기중유3개극륭여HCV환자혈청결합력교고이여정상인혈청결합능력교약;서렬분석발현2개서렬여HCV단백제1 082～1 093화1 954～1 965위(1082YHGAGTRTIASP 1093화1954TQLLRRLHQWIS 1965)안기산유교고적동원성;계산궤보조분석제시저량개위점구유형성표위적성질.결론획득료량개HCV항원표위,재HCV감염적검측중구유잠재적응용개치.
